基于酶催化银沉积原理的1,5-脱水葡萄糖醇电化学传感器研究

来源 :桂林电子科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:iceman923
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1,5-脱水葡萄糖醇(l,5-anhydroglueitol,1,5-AG)是一种反应血糖水平的重要生物标志物,临床上常通过检测人体血清中1,5-AG的浓度进行糖尿病的诊断、发展程度判断、治疗效果评估。论文瞄准人体血清中1,5-AG的检测问题,在LAPS芯片表面修饰吡喃糖氧化酶(Pyranose Oxidase,PROD)作为电化学探针,基于酶催化银沉积原理,设计一种能特异性检测1,5-AG的光寻址电位型电化学生物传感器(Light Addressable Potentiometric Sensor,LAPS)。论文主要研究内容如下:构建LAPS生物传感界面。以1,5-AG为测试对象,通过层层自组装将能特异性识别1,5-AG的吡喃糖氧化酶修饰在LAPS芯片表面,构建LAPS生物传感界面;优化PROD的固定化条件,通过在硅烷化的LAPS芯片上修饰纳米金吸附层提高识别分子的负载量。利用纳米金良好的生物相溶性和吸附作用将能特异性识别1,5-AG的PROD固定到LAPS芯片表面,增加被固定酶的稳定性和有效保持被固定酶的生物活性。搭建基于Lab VIEW平台的LAPS检测系统。以ICL8038信号发生器芯片制作LAPS寻址光源的可调制驱动信号源,设计自动功率控制电路(Automatic Power Control:APC)控制寻址光源的驱动电流,使寻址光源输出功率在工作温度范围内保持恒定,利用Lab VIEW软件搭建采集系统对数据进行采集、处理并绘制电流-电压(I-V)曲线。基于酶催化银沉积原理来实现对1,5-AG的特异性检测。利用PROD对1,5-AG的催化作用,生成还原性物质双氧水。双氧水将电解质溶液中的银离子还原为银单质使溶液中的银离子浓度减小,导致LAPS芯片表面的膜电位发生变化,膜电位的变化也反映了1,5-AG浓度的变化。研究结果表明:电压偏移量与1,5-AG浓度在60μg/m L至225μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9977,检测限为40μg/m L,相对标准偏差为1.37%,1,5-AG的回收率在92.95-103.50%范围内,并且特异性良好。
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