论文部分内容阅读
目的:中药在抗肝损伤动物模型的作用已得到广泛学者的认可,但单一药物起效慢,真正在临床上得到充分应用的很少。目前国内外对中药抗肝损伤的研究,特别是对多种药物混合后的相互作用与作用机理的研究尚缺乏,直接局限了中药在临床疾病治疗的应用。本研究意在探究姜黄素、生态动力素(多种微量元素)抗急、慢性肝损伤的作用,且两者联合用药后有无协同抗肝损伤的作用,并进一步探讨其抗肝纤维化的机制。 方法: 第一部分:研究姜黄素和生态动力素的抗急性肝损伤作用 提前1周给予BALB/c小鼠姜黄素、3个不同剂量的生态动力素混悬液灌胃干预,末次灌胃给药后给予腹腔注射0.2% CCl4油剂建立急性肝损伤模型。分别检测各组小鼠的血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;进行小鼠肝组织HE染色,初步评价姜黄素和生态动力素的抗急性肝损伤作用。 第二部分:探讨姜黄素联合生态动力素通过调节Nrf2氧化应激通路抗肝纤维化的作用及机制 BALB/c小鼠被反复腹腔注射20% CCl4油剂,每周2次,连续6周。建立肝纤维化模型的同时给予姜黄素、生态动力素及联合药物的混悬液灌胃给药。检测各组小鼠血清ALT、AST和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)水平;行小鼠肝组织HE染色、天狼猩红染色,评价姜黄素、生态动力素及联合给药的抗肝纤维化效果。Real Time PCR检测小鼠肝组织内Nrf2、GSH-PX的mRNA表达,探讨姜黄素联合生态动力素通过调节Nrf2氧化应激通路抗肝纤维化的机制。 结果: 第一部分:研究姜黄素和生态动力素的抗急性肝损伤作用 0.2% CCl4油剂单次腹腔注射可造成小鼠明显的急性肝损伤模型,表现为CCl4注射24h后小鼠血清ALT、AST水平较正常组明显增高(P<0.01);肝组织经HE染色镜下观察示小鼠肝组织内细胞呈现大量坏死的状态。姜黄素、生态动力素干预治疗后较模型组显著降低小鼠血清ALT、AST水平,组织学上减轻小鼠急性肝细胞坏死的程度。 第二部分:探讨姜黄素联合生态动力素通过调节Nrf2氧化应激通路抗肝纤维化的作用及机制 20% CCl4油剂持续的注射可有效的诱导小鼠肝纤维化模型的形成,表现为较正常组小鼠分离血清中ALT、AST水平模型组明显增高;肝组织HE染色呈现出肝细胞有大量片状的坏死,细胞脂肪样病变,小叶结构紊乱,并且伴随炎症细胞的浸润,脉管区纤维组织增生并蔓延,肝实质内纤维组织增生显著;姜黄素、生态动力素及联合给药能显著减低(P<0.01)小鼠血清ALT、AST水平,组织学上明显减轻小鼠肝细胞损伤和炎症细胞浸润。天狼猩红染色示小鼠肝纤维化程度较模型组同步明显减轻。姜黄素、生态动力素及联合给药组小鼠血清SOD、GSH-PX水平较模型组明显增高(P<0.01),MDA水平较模型组减低。Real TimePCR检测结果示姜黄素、生态动力素及联合给药组小鼠肝组织内Nrf2、GSH-PXmRNA表达水平较模型组明显升高(P<0.05)。但联合给药组与姜黄素组比较小鼠血清学检测结果无明显差异,肝纤维化程度差异不明显。 结论: 1.姜黄素和生态动力素均有抗急性肝损伤的作用。 2.姜黄素和生态动力素均有抗肝纤维化的作用。 3.姜黄素联合生态动力素抗肝纤维化的作用机制可能与Nrf2介导的氧化应激通路有关。 4.联合用药未能明显增强姜黄素的抗肝纤维化作用。