具有黏附性乳杆菌的筛选与特性研究

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黏附定植特性是益生菌筛选的重要指标之一,本文从15株乳杆菌中筛选出有较强黏附性的唾液乳杆菌水杨素亚种CH10(Lactobacillus salivarius)和小鼠乳杆菌M8(Lactobacillus murinus )2株,对它们的部分生理性状、肠胃耐受能力、调节动物肠道菌群能力以及供试菌株安全性进行了研究,以期为优良的乳酸菌发酵剂及微生态制剂的研发提供理论依据和技术支持。1、采用碳烃化合物黏着技术(WATH)检测供试菌株的疏水性和自聚集性表明,15株乳杆菌中3株具有较高的表面疏水性,分别是菌株Ind3(31.75±1.46)%、菌株CH10(29.81±1.27)%和菌株M8(22.45±1.74)%,且菌株表面疏水性与其自聚集性存在较强一致性。2、对3株菌的生长特性、耐盐性、耐酸性和肠胃环境耐受能力研究表明,菌株Ind3无法耐受pH 2.5的酸性环境;菌株CH10和M8能够在18%浓度的NaCl条件下生长,能耐受pH 2.5的酸性环境。模拟肠胃环境表明,菌株CH10和M8对胆汁盐、胰蛋白酶和胃蛋白酶均具有良好的耐受性。经形态学、生理生化特性以及16S rDNA扩增与测序,确定菌株CH10为唾液乳杆菌水杨素亚种(Lactobacillus salivarius),菌株M8为小鼠乳杆菌(Lactobacillus murinus)。3、对灌胃小鼠体重增长、粪便中β-半乳糖苷酶活性及肠道菌群分析表明,当给小鼠饲喂含有1×10~9cfu/mL的唾液乳杆菌水杨素亚种CH10和小鼠乳杆菌M8的脱脂乳菌悬液10d后,小鼠体重增长及β-半乳糖苷酶活性明显高于对照组,肠道菌群中的有益菌(双歧杆菌、乳杆菌)数量得到明显改善,有害菌(肠杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌)数量明显减少,表明外源服用唾液乳杆菌水杨素亚种和小鼠乳杆菌能够在肠道内定植,平衡有益和有害微生物菌群。4、实验组小鼠肝、肾解剖分析发现,灌胃益生菌组小鼠肝脏和肾脏与对照组均无明显差异,表明2株实验用菌株比较安全,可用于微生态制剂开发和研究。
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