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目的:通过观察胰岛素及不同浓度葡萄糖对大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell，HSC)增殖及其转化生长因子β1(Transforming growth factor beta 1，TGF-β1)、金属蛋白酶组织抑制因子1(Tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP-1)mRNA表达的影响，以进一步探讨糖尿病性肝纤维化的发生机制，为临床糖尿病相关性肝纤维化的发生和防治提供理论和实验依据。方法:将体外培养的大鼠肝星状细胞株以单纯高糖及高糖加高胰岛素作为刺激因子，以甘露醇作为高渗透压对照。分别设不加胰岛素糖组和加胰岛素糖组两大组。不加胰岛素糖组包括:正常糖组(5.6mmol/L)、高糖A组(15mmol/L)、高糖B组(25mmol/L)、高糖C组(35mmol/L)、甘露醇组(29.4mmol/L甘露醇+5.6mmol/L葡萄糖)；加胰岛素糖组包括:胰岛素正常糖组(5.6mmol/L糖+150nmol/L胰岛素)、胰岛素高糖A组(15mmol/L糖+150nmol/L胰岛素)、胰岛素高糖B组(25mmol/L糖+150nmol/L胰岛素)、胰岛素高糖C组(35 mmol/L糖+150nmol/L胰岛素)、胰岛素甘露醇组(29.4 mmol/L甘露醇+5.6mmol/L葡萄糖+150nmol/L胰岛素)。上述10组HSC培养一定的时间后，采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定各组细胞的吸光度值以明确HSC的增殖数目，3H-胸腺嘧啶掺入法(3H-TDR掺入法)测肝星状细胞DNA的Cpm值以明确HSC的增殖状态，实时荧光定量PCR技术(real-time fluorogenetic quantitative PCR，RT-FQ-PCR)测定各组肝星状细胞TGF-β1、TIMP-1的mRNA表达。结果:1、HSC的吸光度值方面，不加胰岛素糖组HSC吸光度值分别是:正常糖组:1.57±0.01、高糖A组:1.67±0.01、高糖B组:1.77±0.02、高糖C组:1.85±0.02、甘露醇组:1.58±0.03。加胰岛素糖组值分别是:胰岛素正常糖组:1.55±0.18、胰岛素高糖A组:1.66±0.02、胰岛素高糖B组:1.75±0.06、胰岛素高糖C组:1.81±0.02、胰岛素甘露醇组:1.57±0.03。结果表现为HSC增殖呈葡萄糖浓度依赖性增加，相同糖浓度的加胰岛素糖组HSC增殖较未加胰岛素糖组无明显增加。甘露醇组与正常糖组值比较、胰岛素甘露醇组与胰岛素正常糖组比较HSC吸光度值无统计学意义(p>0.05)。2、HSC DNA的Cpm值方面，不加胰岛素糖组HSC DNA的Cpm值分别是:正常糖组:3419±180.37、高糖A组:7562±1239.61、高糖B组:9886+307.17、高糖C组:11516.50±3066.66、甘露醇组:3619±699.31。加胰岛素糖组值分别是:胰岛素正常糖组:29832±3229.95、胰岛素高糖A组:40707.50±6331.83、胰岛素高糖B组:42960±7029.69、胰岛素高糖C组:56275±7159.59、胰岛素甘露醇组:45716±6218.03。结果表现为HSC DNA合成呈葡萄糖浓度依赖性增加，并且相同糖浓度的加胰岛素糖组HSC DNA合成显著高于未加胰岛素糖组值(p<0.05)。甘露醇组较正常糖组变化不明显，胰岛素甘露醇组Cpm值高于胰岛素正常糖组值。3、各组细胞均有TGF-β1、TIMP-1的mRNA表达，加胰岛素糖组内及未加胰岛素糖组内不同糖浓度间TGF-β1、TIMP-1的mRNA含量无统计学意义。4、总体趋势上，加胰岛素糖组TGF-β1的mRNA量减少，TIMP-1的mRNA量增多。结论:1、高糖可诱导体外培养的大鼠HSC数目增殖，高糖合并胰岛素时诱导的HSC数目增殖与单纯高糖的作用无明显差异，高渗透压并不诱导HSC数目增殖。2、高糖及高胰岛素均可诱导HSC DNA合成增加，高糖与胰岛素并存时HSC DNA的增加显著高于单纯高糖的作用。单纯高渗透压时HSCDNA的含量并不增加，在高渗透压情况下高胰岛素能促进HSC DNA合成增加。3、单纯的高糖不诱导增殖的肝星状细胞TGF-β1、TIM-1的mRNA表达量增加，高胰岛素可能诱导增殖的肝星状细胞TIMP-1分泌增多，TGF-p1分泌减少。