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黄精叶钩吻属(Croomia Torrey)植物,为百部科(Stemonaceae)多年生草本,花部4基数,属单子叶植物网状脉类群。该属植物目前共有3种,其中的C.japonica分布在我国的东南部及日本诸岛;C.heterosepala为日本特有;C.pauciflora分布于美国。该属植物的总体分布呈古老的东亚-北美间断分布,具体在亚洲又呈现为中国大陆-日本岛屿的分布格局。选择黄精叶钩吻属植物作为研究对象不仅可以对该属植物的群体遗传结构及遗传多样性进行检测,还可以对揭示东亚与北美植物区系间关系及物种分化形成机制、研究岛屿植物的演化及其与大陆植物间的关系等植物地理学问题提供一定的依据。
本研究通过SSR分子标记和单拷贝核基因Agtl序列研究了黄精叶钩吻属植物各野生群体的遗传多样性分布格局和种间关系,并对该属植物的演化、形成历史及可能的冰期避难所进行了推测;同时提出了该属植物的保护策略。
主要研究结果如下:
1、SSR引物开发及分析
本研究首次在对黄精叶钩吻属的研究中应用了双重抑制PCR技术,并从C.japonica中分离得到了6对多态性高、特异性好、扩增稳定、重复性高的核微卫星引物。这些引物经通用性检测证实均可在黄精叶钩吻属内3个种中通用,可以应用于Croomia属的遗传多样性、群体遗传结构等群体遗传学研究。
2、黄精叶钩吻属中Agtl单拷贝核基因的序列分析
黄精叶钩吻属Agtl基因单倍型丰富,18个居群共检测到22种单倍型,其中C.japonica14种,C.heterosepala6种,C.pauciflora2种。通过对Agtl基因单倍型的关系和分布的研究,可以推测出以下结论:中国的天目山一带可能是Croomia属植物的分布及起源中心;在欧亚古大陆和北美古大陆分离以前黄精叶钩吻属植物曾经有着非常广泛的分布;东亚种群与北美种群分歧的时间较早,使得两者之间的亲缘关系较远;东亚2个种之间则分化较晚,使得两者的亲缘关系较近。岛屿地形及冰川期避难所造成的时间及空间的隔离,使得Croomia属各居群之间的分化加大,这一点在日本各岛屿上表现的尤其明显,并使Croomia属在日本岛屿上衍生出两个种。
根据Agtl基因单倍型网络图可以得出,C.japonica是祖先种,并由它衍生出了日本的C.heterosepala和北美的C.pauciflora;C.japonica种内各居群间的分化很大,其中琉球居群与C.pauciflora的关系较近,而中国居群与C.Heterosepala关系较近;C.heterosepala分化为两个谱系,表明该种可能为并系起源。
根据Agtl基因单倍型分布及网状关系推测,黄精叶钩吻属植物可能存在多个冰期避难所,C.japonica在中国的冰期避难所应该在天目山一带,而北美大陆C.pauciflora的冰期避难所应位于佛罗里达半岛。
3、Croomia属植物的保护策略
天目山附近的种群遗传多样性最为丰富,且可能是Croomia属植物的演化中心,为最优先保护种群,必须重点保护。每一个Croomia东亚群体都应当尽量保护;如果条件不许可必须迁地保护或进行种质资源收集时要尽量收集齐所有群体的样品,而不是个别群体采集大量个体。