目的:口服结肠定位释药系统(OCDDS)可用于结肠局部病变的治疗,近年来受到广泛重视。天然多糖类化合物作为制剂辅料应用广泛,因其可被结肠菌群释放的酶特异性降解,成为结肠定位给药系统的新型载体材料。海藻酸钠是从海带或海藻中提取的天然多糖类化合物,易溶于水,无毒,有良好的生物降解性和相容性,现已被大量用作药物的缓释和控释材料,广泛应用于片剂、微丸、微囊、脂质体、纳米粒等缓释制剂中。本实验以海藻酸钠为辅料,吲哚美辛为模型药物,制备酶触型海藻酸钠/氯化钙结肠靶向传递系统(enzyme triggered colon specific drug delivery System, ECDDS),可将药物定位于结肠局部释药,提高局部治疗浓度的同时,避免胃、小肠吸收引起刺激的副作用。方法:以海藻酸钠作为辅料,利用海藻酸钠与氯化钙发生胶凝反应,形成疏水性的海藻酸钙骨架结构,药物嵌入骨架结构中形成含药的骨架微丸,结肠部位的特有的酶使海藻酸钙骨架降解,释放药物,实现药物的结肠靶向作用。配制一定浓度的含药海藻酸钠溶液,通过滴头将海藻酸钠溶液滴入一定浓度的氯化钙溶液中,形成含药海藻酸钙微丸。通过单因素试验选择最佳的微丸制备工艺,分别对滴头口径、滴距、滴速、干燥温度和干燥时间等因素进行考察,从而确定最佳制备工艺。在单因素考察基础上,通过正交试验设计筛选优化处方,选择氯化钙溶液浓度、海藻酸钠溶液浓度、氯化钙溶液pH作为三种影响因素,每种影响因素选取两个不同水平,按L4 (23)正交试验处方,综合评价微丸形态和释放度,通过级差分析和方差分析,确定微丸的最佳处方。在文献报道和预试验基础上,建立紫外分光光度法(UV)和高效液相分析方法(HPLC),测定吲哚美辛微丸的释放度。对制成的微丸进行释放度考察,在参考USP23和参考文献的基础上,结合本实验确定释放方法。考察高温、高湿和强光照射等因素对微丸稳定性的影响,分别于试验期间第5天和第10天取样一次,观察其性状和测定释放度。以大鼠为实验动物,随即分为两组,在乙醚轻度麻醉下通过聚乙烯管为大鼠灌下含药海藻酸钠/氯化钙微丸(实验组)或自制吲哚美辛混悬液(对照组)。用高效液相色谱法测定给药后不同时间的血药浓度,以及胃、小肠、盲肠和结肠等部位内容物中药物的分布情况。结果:通过对微丸制备工艺的考察,确定滴头口径0.9mm,滴距3cm,滴速2ml/min,干燥温度45℃,干燥时间24h是制备微丸的最佳工艺。处方单因素试验显示,氯化钙溶液浓度、海藻酸钠溶液浓度和氯化钙溶液pH对微丸的释放有较大影响,对正交试验结果进行极差分析,确定制备微丸的最优处方为:1%氯化钙溶液浓度,2%海藻酸钠溶液浓度和pH4氯化钙溶液。吲哚美辛微丸HPLC释放度测定方法的系统适用性试验结果:吲哚美辛的保留时间为9.995min;方法回收率在:93.80%～101.28%,方法精密度RSD小于3%,符合中国药典规定。此方法能够准确测定吲哚美辛微丸的释放度。在高温条件下,微丸的性状及释放度均无显著性变化,表明吲哚美辛微丸对热稳定。在高湿条件下,微丸吸湿严重,表明吲哚美辛微丸对湿不稳定,应在干燥环境下保存。在光照条件下,微丸的性状无显著性变化,释放度稍有降低,表明吲哚美辛微丸对光不稳定,应避光保存。吲哚美辛微丸(实验组)大鼠口服给药后盲肠和结肠中吲哚美辛的浓度明显高于对照组,平均峰浓度分别为1.24±0.15μg/g和1.97±0.26μg/g,血药浓度相对较低而平稳,达峰时间为13 h,峰浓度6.26±1.08μg/g;吲哚美辛混悬液(对照组)平均峰浓度为0.22±0.05μg/g和0.58±0.09μg/g,血药浓度相对较高,达峰时间为3h,峰浓度为10.14±1.89μg/g。微丸中吲哚美辛主要分布于盲肠和结肠中,而在上消化道中检测到很少的药物。混悬液中的吲哚美辛主要分布于上消化道,盲肠和结肠中的药物浓度却很低。实验组和对照组的AUC值分别是71.35±2.56μg·h/mL和88.67±8.34μg·h/mL,统计分析表明两者之间有显著性差异(p<0.05)。和对照组相比,实验组的相对生物利用度为80.47%。结论:以海藻酸钠/氯化钙为辅料制备的吲哚美辛微丸具有良好的体外释药特征,重现性好;微丸和混悬液中的吲哚美辛在体内的分布是不同的,混悬液中的吲哚美辛主要分布于上消化道;而微丸中的吲哚美辛,主要分布于盲肠和结肠。药物在消化道的吸收部位不同,其药代动力学特征和参数也不同。总之,本实验制备的海藻酸钠/氯化钙结肠靶向微丸在大鼠体内有良好的结肠靶向性,在大肠部位,呈现相对较高的局部药物浓度和较长时间暴露于靶部位,对结肠疾病有较好的治疗作用,也降低了其副作用。