本文围绕生物传感器技术研究,探索了膜片电极支撑双层脂膜(BLMs)的制备及检测单核增生李斯特氏菌(LM)的压电基因传感器技术,主要工作如下: 1.制备膜片电极支撑双层脂膜。制备方法操作简单,成膜重现性较好,并用短杆菌肽离子通道蛋白对所制备的双层脂膜的真实性进行了确证,为进一步将膜片电极支撑双层脂膜应用于离子通道研究及超痕量物质的快速检测等奠定了技术基础。 2.研究了适合构建压电基因传感器的、具有良好LM特异性的DNA检测探针,为研制检测LM的压电基因传感器技术提供了物质基础。同时,所设计的DNA探针也可应用于其它基于DNA杂交或PCR扩增检测LM的方法,具有较广泛的适用性。 3.合成新型活性偶联化合物TAPD(N-[6-(thien-3-yl)acetoxyl]-pyrro-lidine-2, 5-dione),该化合物可自组装在金电极上,其分子结构使所偶联的DNA探针的空间位阻较小,有利于DNA杂交反应的进行,并且在偶联过程中不需对其进行活化。TAPD不仅可用于在金电极上偶联DNA探针,也可用于偶联抗体、酶等其他生物分子,应用前景良好。 4.研究了通过TAPD偶联的压电基因传感器电极表面固定化方法。所建立的固定化方法程序简单,操作方便,固定时间较短,固定化探针不易脱落,具有实际应用价值。用该技术构建的压电基因传感器能够实时检测DNA杂交反应,同时,该固定化技术在其他类型生物传感器研究中也有一定的应用价值。