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本研究目的在于揭示与奶牛热应激相关的细胞免疫调控及分子机理。通过全血自动分析仪分析热应激奶牛外周的各项生理指标;流式细胞术分析热应激奶牛外周淋巴细胞的细胞周期及凋亡率;半定量RT-PCR分析外周淋巴细胞HSP70mRNA、HSF1mRNA、BC1-2mRNA和Bax-αmRNA基因表达水平;荧光定量PCR分析Bax-αmRNA基因表达;PCR-SSCP技术分析HSP70基因5’-侧翼区SNPs;pET-32a-c(+)表达bHSP70蛋白,并分析了了bHSP70生物活性。研究结果如下: 1 热应激对奶牛外周血各项生理指标的影响 全自动血细胞分析仪分析日平均气温分为37.5℃(高温)、26.5℃(临界高温)和5.5℃(对照)条件下奶牛外周白细胞总数(White blood Cell,WBC)、淋巴细胞总数(lymphocyte,LYMPH)、中性粒细胞(granulocyte,GRAN)、单核细胞(mid-cell,MID)、淋巴细胞百分比(LYMPH%)、单核细胞百分比(MID%)、中性粒细胞百分比(GRAN%)、红细胞计数(red blood cell,RBC)、血红蛋白含量(hemoglobin,HGB)、平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)、红细胞比积(hematocrit,HCT)、平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)、红细胞分布宽度(red cell distribution width,RDW)、血小板计数(platelet count,PLT)、平均血小板体积(mean platelet volume,MPV)及血小板比积(platelet-crit,PCT),等各指标的变化规律。 研究发现白细胞计数(White blood cell,WBC)(14.75×109/L)和红细胞计数(red blood cell,RBC)(3.85×1012/L)在高温37.5℃时最低,随温度下降而逐步上升。RBC和血红蛋白(hemoglobin,HGB)在37.5℃最低,随温度降低逐步升高,相对于其它两个温度差异显著;红细胞平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)在26.5℃最高(18.82pg),相对于其它温度差异显著。红细胞平均血红蛋白浓度(mean Corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)和MCH水平在高温下明显高于对照组。