肿瘤转移是临床抗肿瘤治疗失败和患者死亡的主要原因,因此,控制转移是决定癌症患者预后的关键因素。肿瘤转移是一个复杂的、多步骤的过程。血行转移是肿瘤转移最重要的途径。肿瘤细胞与血管内皮细胞问的相互作用是血行转移最复杂、最重要的环节。已有研究表明,肿瘤细胞转移过程中伴随着血管内皮细胞的皱缩和凋亡,且血管内皮细胞内第二信使Ca²⁺浓度及pH值的改变与细胞凋亡密切相关。小檗碱（Berberine）是消化系统感染常用药。近来研究发现,小檗碱还具有抑制肿瘤细胞生长的作用。我们也对其抗肿瘤作用进行了初步研究,发现小檗碱具有抑制肺癌细胞增殖,抑制实体瘤生长及减少肺内转移灶的作用。但其抗肿瘤转移的机制还有待进一步深入研究。激光扫描共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM）是现代生物学中用于无损伤观察活细胞和组织的一种重要方法。与特异性荧光探针结合,广泛应用于在活细胞层次监测一些重要生化成分的空间分布和随时间的变化,从而获得生命活动过程的信息。本实验将利用共聚焦显微镜研究小檗碱抗人高转移性肺癌细胞（PG细胞）诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）凋亡的作用,阐明其抗肿瘤转移的可能机制。1目的研究小檗碱抗PG细胞上清液诱导的HUVEC凋亡的作用,阐明小檗碱抑制肿瘤细胞转移的机理。利用共聚焦荧光成像技术观察小檗碱对肿瘤转移的影响,从细胞、亚细胞水平上阐明药物与细胞的作用机制,为中药研究开辟一条新的研究途径。2方法首先用MTT法筛选出有效影响HUVEC活性的PG细胞培养上清液浓度与作用时间,建立PG细胞上清液诱导HUVEC凋亡模型。用共聚焦荧光成像技术观察小檗碱抗HUVEC凋亡效应,具体方法:药物防治组用不同浓度小檗碱处理HUVEC后,再与PG细胞培养上清液作用。经MTT法检测不同药物浓度、不同药物作用时间下HUVEC的活性,以确定小檗碱防治的最佳药物剂量和最佳作用时间。应用激光扫描共聚焦显微镜技术测定HUVEC凋亡百分率、细胞核形态、细胞内Ca²⁺浓度及pH值变化。3结果（1）小檗碱能够明显降低PG细胞上清液诱导的HUVEC凋亡百分率。（2）小檗碱可有效减轻HUVEC细胞核染色质浓缩等凋亡形态变化。（3）小檗碱可缓解PG细胞培养上清液引起的HUVEC内Ca²⁺浓度升高。（4）小檗碱可改善PG细胞培养上清液引起的HUVEC内pH值下降。4结论小檗碱能够抗PG细胞诱导的HUVEC凋亡,使细胞结构和功能趋于恢复正常,并呈现剂量依赖关系。其作用机制可能是通过调控细胞内Ca²⁺浓度,改善pH值,从而抑制内皮细胞凋亡,防止肿瘤转移。