母体效应对西方蜜蜂(Apis mellifera)蜂王发育的影响

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人类饲养蜜蜂的历史悠久。蜂王是蜂群中的核心,其质量的好坏对蜂群影响很大。人工育王技术一直广受科学研究者的关注。母体效应是母代所经历的环境或所采取的行为,对子代表型的影响,它是一种非遗传效应,是一种重要的适应性表观遗传机制。本研究以西方蜜蜂(Apis mellifera)为实验材料,探讨母体效应对卵大小以及对蜂王发育的影响。利用免移虫育王技术分析比较了蜂王在王台中产的卵(简称QE)和在工蜂巢房中产的卵(简称WE)重量和大小;利用QE、WE和2日龄幼虫(以下简称2L)分别培育蜂王,并测定蜂王初生重和卵巢管数。结果表明:QE与WE相比,重13.26%(157.51±12.37μg vs 138.93±10.90μg);长2.43%(1.56±0.04 mm vs 1.52±0.05 mm,);宽4.18%(0.374±0.010 mm vs 0.359±0.013 mm)。QE蜂王初生重显著高于WE蜂王和2L蜂王。5群蜂中有3群蜂比WE蜂王初生重的差异极显著(258.65±22.82 mg vs 234.50±36.00 mg)。5日龄QE蜂王右侧卵巢的卵巢管数是最多,与2L相比差异显著(165.50±10.65 vs 145.90±14.89);但与WE相比差异不显著(165.50±10.65 vs 160.00±9.48)。利用RNA-Seq测序技术于2016年和2018年两次检测了QE、WE与2L培育的刚羽化蜂王m RNA表达,分析比较了初生蜂王基因表达差异。两年的2次转录组测序结果发现,三组间均存在大量差异表达基因。2016年共鉴定出121个差异表达基因,其中QE蜂王与2L蜂王对比组差异表达基因数为91个,高于QE蜂王与WE蜂王对比组(63个)及WE蜂王与2L蜂王对比组(37个),表明2L/QE之间的差异高于WE/QE、2L/WE两者之间的差异。2018年转录组测序结果与2016年相比,两者差异基因的情况差别很小,其中QE蜂王与2L蜂王对比组差异表达基因数为485个,高于QE蜂王与WE蜂王对比组(156个)及WE蜂王与2L蜂王对比组(362个),表明2L/QE之间的差异高于WE/QE、2L/WE两者之间的差异。2016年转录组测序中的59个差异表达基因在2018年再次转录组测序中被鉴定出来了。两年的转录组测序结果表明:2L/QE差异表达基因最多,其次是2L/WE,再次是WE/QE,这些差异表达基因,很大一部分与蜂王级型分化相关,包括保幼激素甲基转移酶、抗菌肽、储存蛋白等,参与了激素合成、卵巢发育、表皮发育和免疫功能。利用全基因组DNA甲基化测序技术检测了QE、WE与2L培育的刚羽化的蜂王的甲基化,结果表明:QE、WE与2L刚羽化的蜂王整体甲基化水平显著不差异。三组间均存在大量的差异甲基化基因(DMGs),QE蜂王与2L蜂王对比组差异甲基化基因数为614个数量最多;其次是WE蜂王与2L蜂王对比组差异甲基化基因473个,再次是QE蜂王与WE蜂王对比组差异甲基化基因371个。42个DMGs存在于m TOR、MAPK、Wnt、Notch、Hedgehog、Fox O和Hippo信号通路中,这些信号通路参与调控级型分化、繁殖和寿命。证明蜜蜂母体效应会引起表观遗传差异,进而影响蜂王的级型分化。将QE、WE与2L刚羽化的的转录组数据与甲基化数据进行联合分析。结果表明:QE、WE与2L蜂王转录组表达水平与甲基化水平相关性较低,表明三组的DNA甲基化与基因表达之间呈现非常弱的相关性。比较分析了参与免疫反应和发育的差异基因的表达与DNA甲基化之间的关系。结果表明:只有很少一部分基因的DNA甲基化与基因表达呈现负相关关系。
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