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颅脑损伤是危及人类生命的常见疾病。中医学认为“血瘀”为脑损伤的基本病机,针灸作为中医学独特的治疗方法,其在治疗颅脑损伤中的作用已得到证实。文献研究表明其机制可能与抑制细胞凋亡,提高超氧化物岐化酶水平,减轻自由基反应,减轻脑组织细胞内钙离子超载,降低细胞因子含量等有关。现今的实验研究围绕损伤后继发性损伤机制展开。颅脑损伤后除了直接的细胞死亡、坏死,还会有脑神经细胞的凋亡,其发生是细胞内外因子和凋亡调节基因共同作用的结果。目前防治脑损伤后的继发性损害,最大程度减轻脑功能损害,是医学工作者的研究重点。目的:本研究参照Feeney自由落体冲击造模法建立脑外伤大鼠模型,采用活血化瘀、开窍通络的治疗原则,选取与脑联系密切、临床疗效显著的穴位组方:百会、人中、风府透哑门、合谷,从损伤脑组织病理变化、损伤程度、神经细胞凋亡情况等方面观察针刺对脑损伤影响,探讨针刺治疗颅脑损伤的作用机制,为临床针灸治疗颅脑损伤提供有力证据。方法:SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为4组,A组为假手术组;B组为模型组;C组为药物组;D组为针刺组。B组、C组和D组麻醉成功后参照Feeney自由落体冲击造模法建立脑挫伤大鼠模型,C组和D组造模后24h开始治疗。D组将针刺入穴位2mm,采用捻转手法,每穴操作2分钟;C组腹腔注射1%纳洛酮,治疗均24小时一次,治疗7次。治疗结束当天取大鼠脑组织作冠状切片,组织切片HE染色,采用光学显微镜及生物医学图像分析系统观察各组大鼠脑组织病理变化并计算坏死面积。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法,原位检测脑外伤脑细胞凋亡。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子与白细胞介素。结果:1.病理观察见:B组大脑皮质内见血肿,损伤区神经组织坏死、液化、形成软化灶,软化灶内可见出血、炎性细胞浸润,严重者可见损伤区脑组织缺如,其范围大于创伤面积;C组和D组脑组织损伤减轻,C组大脑皮质水肿,部分神经元变性坏死、出现核固缩现象;D组大脑皮质水肿,偶见出血,部分神经元坏死、液化,可见少量核固缩;A组大脑皮质神经元未见组织水肿及神经元变性坏死。2.脑损伤大鼠脑组织坏死面积提示:B组损伤区脑组织坏死面积为8.39±0.67,大于创伤面积(3.14×1.5~2=7.065)(P<0.01);C组、D组坏死面积分别为5.25±0.60、4.47±0.40,均明显小于B组(均P<0.01),且均小于损伤面积(均P<0.01)。D组坏死面积较C组有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05)。3.脑损伤大鼠脑细胞凋亡的提示:B组损伤区神经细胞凋亡数为28.41±4.37,与A组(5.31±1.36)相比具有统计学意义(P<0.01);C组、D组神经细胞凋亡数分别为12.18±3.52、11.54±2.07,均明显低于B组(均P<0.01),且与A组比较均有统计学意义。D组凋亡细胞数较C组下降,且有统计学意义(P<0.01)。4.脑损伤大鼠细胞因子(TNF、IL-2)的提示:脑损伤模型B组大鼠血清中IL-2、TNFα含量明显高于A组(P<0.01),D组及C组IL-2、TNFα明显降低,但仍然高于A组(P<0.05),而与B组比较则显著降低(P<0.01)。结论:针刺治疗方法具有减轻创伤性脑损伤模型大鼠脑组织病理损伤程度,缩小坏死面积,抑制细胞凋亡,降低升高的细胞因子含量的作用,可能可以通过对IL-2、TNFα等细胞因子的调控,发挥其抗细胞凋亡的作用,保护神经细胞,减轻脑损伤继发性损害。