【摘 要】
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目的:探讨外源性硫化氢后处理是否通过激活P13K-Akt信号通路及调节Bcl-2家族蛋白减轻大鼠离体心肌的缺血再灌注损伤。
方法:84只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为6组
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目的:探讨外源性硫化氢后处理是否通过激活P13K-Akt信号通路及调节Bcl-2家族蛋白减轻大鼠离体心肌的缺血再灌注损伤。
方法:84只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为6组(n=14):空白对照组(CON),缺血/再灌注组(I/R),硫化氢后处理组(N),溶媒组(D),LY294002组(L),硫化氢后处理+LY294002组(N+L)。采用离体心脏Langendorff灌注模型,除CON组持续灌注120min,其余各组平衡灌注20min后,停灌40min,复灌60min。记录平衡末及灌注结束时的心率(HR)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)、左室发展压(LVDP)、左室舒张末期压(LVEDP)、冠脉流量(CF);灌注结束时,TTC法染色并计算心肌梗死面积百分比,TUNEL法检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数(AI),心肌组织石蜡切片HE染色:Western blot半定量测定p-Akt、总的Akt、p-Bad、总的Bad、Bcl-2、Bax的表达水平。
结果:平衡末各组间心功能指标(基础值)差异未见统计学意义(P＞0.05)。复灌60min时,与CON组比较,FR组使HR、LVDP、+dp/dtmax下降明显(P＜0.05),心肌梗死面积明显扩大和凋亡指数升高(P＜0.05);与I/R组相比,N组能明显改善心功能的各项指标(P＜0.05),使心肌梗死面积缩小和凋亡指数降低(P＜0.05),心肌组织形态有改善,p-Akt、p-Bad、Bcl-2表达水平升高,而Bax表达水平降低(P＜0.05);LY294002逆转了硫化氢后处理改善心功能指标、降低心肌梗死面积和凋亡指数,升高p-Akt、p-Bad、Bcl-2表达水平,降低Bax表达水平的作用,N+L组与N组比较,p-Akt、p-Bad、Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高(P＜0.05)。
结论:外源性硫化氢后处理通过激活PI3K-Akt信号通路和调节Bcl-2家族蛋白的表达,参与缺血再灌注损伤的离体大鼠心肌的保护作用。
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