补肾法诱导骨髓间充质干细胞成软骨化研究及治疗膝骨关节炎的观察

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目的探讨中药单体淫羊藿甙对骨髓间充质干细胞增殖及向成软骨细胞分化的影响;观察补肾法治疗早、中期骨性关节炎的疗效。方法实验方面:收集体外培养的第3代人骨髓间充质干细胞,分为5组:淫羊藿甙组,分低、中、高剂量3组(浓度分别为20μ g/L、40μ g/L、60μ g/L);对照组,加入诱导液(TGF-β110μg/L、Dex0.1μmol/L、VitC50mg/L);空白组。培养14-21天。诱导后第1、3、5、7、9天分别采用MTT法观察骨髓间充质干细胞细胞增殖及分化情况,甲苯胺蓝染色法、免疫组化法鉴定软骨细胞。临床方面:采用自身前后对照研究方法,选择符合早、中期膝骨关节炎诊断标准患者40例,给予补肾中成药仙灵骨葆胶囊(主要成分为淫羊藿甙)口服,用法:3粒/次,2次/天,疗程6周。以WOMAC指数及中医证候评估治疗前后的疗效。运用SPSS17.0统计软件包对数据资料进行统计学。结果实验结果:高剂量淫羊藿甙组(60μ g/L)OD值最高,低剂量淫羊藿甙组最低;高剂量淫羊藿甙组第7、9天OD值与比空白组比较,P<0.05,有显著性差异,而与诱导剂组效果相当,P>0.05;低、中剂量淫羊藿甙组第5、7、9天OD值与比空白组高,P>0.05,但无显著性差异。临床结果:经治疗后,疼痛、功能、WOMAC骨关节炎指数明显改善,较前比较均有显著意义(P<0.05)。治疗显效3例(8.0%),有效33例(82.5%),无效4例(9.5%),总有效率90.5%。结论1、淫羊藿甙对骨髓间充质干细胞有促进增殖作用,并且可以诱导其向软骨细胞分化;2、在20μ g/L-60μ g/L的浓度范围内,淫羊藿甙的浓度越高,诱导效果越好;3、中成药仙灵骨葆胶囊治疗早、中期膝骨性关节炎有效,可以有效减轻疼痛,延缓骨关节炎的进展。
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