联合应用5-<'125>I-2’-脱氧尿嘧啶核苷与均衡的脱氧核糖核苷杀伤大鼠C<,6>胶质瘤细胞的实验研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuliangmike
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目的:1、研究不同放射性浓度和培养时间条件下,<125>I-UdR对大鼠C<,6>神经胶质瘤细胞的杀伤效应;2、研究<125>I-UdR与均衡的脱氧核糖核苷合用对杀伤效应的协同作用.方法:1、在大鼠C<,6>神经胶质瘤细胞的培养液中,加入不同放射性浓度<125>I-UdR培养24h,通过细胞形态学观察、细胞存活实验及流式细胞仪检测细胞凋亡率来观察结果:加入相同放射性浓度<125>I-UdR,培养不同时间,以细胞存活分数为指标观察不同作用时间下的结果;2、在74KBq/ml的<125>I-UdR浓度下,再添加不同浓度均衡的脱氧核糖核苷培养24h,以形态学、细胞存活实验、TEM及琼脂糖凝胶电泳的方法观察对C<,6>细胞的杀伤效应;同时利用相同浓度的均衡脱氧核糖核苷,培养不同时间,利用细胞存活实验观察不同时间条件下的作用结果.结果:1、在加入不同放射性浓度的<125>I-UdR培养24h后,细胞形态上表现为细胞皱缩、变圆、脱落,贴壁细胞数目减少,细胞存活分数随着浓度升高明显下降,同一浓度下和对照组相比较,存在统计学意义.同时FCM检测随着<125>I-UdR的升高,细胞凋亡率增加,24h细胞凋亡率最高接近20%.不同作用时间下,C<,6>细胞存活分数随时间延长而逐渐降低,48h较24h细胞存活分数下降近两倍;2、在74KBq/ml<125>I-UdR浓度下,添加不同浓度的AUCG培养24h,细胞脱壁现象更加明显,细胞存活分数随AUCG浓度升高而降低,电镜观察到细胞的核浓缩及染色质边集现象明显,并出现凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳细胞基因组DNA断裂呈现出典型的"梯度条带".在相同的AUCG(30 μ M)浓度下,细胞存活分数随时间延长而下降.结论:1、<125>I-UdR对大鼠C<,6>神经胶质瘤细胞具有明显的杀伤效应,并随着浓度的提高和时间的延长而加强,机理可能是通过诱导细胞的凋亡而起作用;2、AUCG可以增强<125>I-UdR的杀伤效应,这种增强作用在AUCG低浓度时表现的非常明显,而高浓度时逐渐消失.可能机理为AUCG促进细胞提前进入S期,提高了<125>I-UdR掺入率,进而增加了<125>I-UdR诱导细胞凋亡的作用.
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