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目的:研究α7胆碱能受体激动剂PNU-282987对体外IL-4诱导小鼠肺泡巨噬细胞MH-S的M2型极化的作用,及其对信号转导和转录激活因子-6(STAT6)、过氧化物酶增殖活化受体gamma(PPARγ)等信号通路的影响。方法:体外培养小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S,按下文进行实验分组和检测:1.不同浓度的PNU-282987对IL-4诱导的MH-S细胞M2型极化的影响:细胞随机分为5组,(1)对照组:用含0.1%DMSO(PNU-282987溶剂)的培养基处理;(2)IL-4组:用含0.1%DMSO的培养基处理30min后,加入IL-4,IL-4终浓度为10ng/ml;(3-5)PNU-282987+IL-4组:用含不同浓度的PNU-282987(低浓度:0.1μM,1μM,10μM,高浓度:100μM,300μM,500μM)的培养基预处理30min后,加入IL-4,IL-4终浓度为10ng/ml;每组至少设置3个复孔。用RT-PCR和Western Blot检测Arg1、CD206、Ym1、Fizz表达。2.抑制STAT6和PPARγ激活对PNU-282987和IL-4诱导的MH-S细胞M2极化的影响细胞随机分为5组,(1)对照组:用含0.1%DMSO(PNU-282987溶剂)的培养基处理;(2)IL-4组:用含0.1%DMSO的培养基处理30min后,加入IL-4,IL-4终浓度为10ng/ml;(3)PNU-282987+IL-4组:用100μM的PNU-282987的培养基预处理30min后,加入IL-4,IL-4终浓度为10ng/ml;(4-5)抑制剂组:在PNU-282987和IL-4处理前30min加入GW9662(终浓度为1μM)或STAT6抑制剂来氟米特(终浓度为100μM)。每组至少设置3个复孔。用RT-PCR和Western Blot检测p-STAT6、PPARγ、Arg1、CD206、Ym1表达,用流式细胞术检测CD206表达。结果:给予PNU-282987可显著增加IL-4诱导MH-S细胞M2型标志物的表达,给予STAT6和PPARγ抑制剂后,逆转了由PNU-282987促进的IL-4诱导的MH-S细胞M2型标志物表达。结论:PNU-282987能促进IL-4诱导的MH-S细胞向M2型极化,其机制可能涉及上调MH-S细胞内磷酸化STAT6和胞核PPARγ的表达。