杏鲍菇和金针菇菌种质量控制技术研究

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菌种生产作为食用菌生产的关键环节之一,菌种质量的优劣直接关系到食用菌产业是否能够良性发展。本研究以两个金针菇的F0005、F0030菌种和三个杏鲍菇的Ple0002、Ple0066、阳杏菌种为材料,从菌种生产、菌种纯度、菌种保藏时间三个方面进行比较研究,旨在建立一套比较完整的菌种质量控制技术。主要结果如下:1.菌种生产技术菌种培养的营养条件和生长条件直接关系到菌种的质量,因此本文分别对金针菇和杏鲍菇的培养基质主料进行比较研究,分别筛选出较适合的培养基质主料,同时探讨了培养基的含水量和酸碱度以及菌种的培养温度对菌种质量的影响。试验结果表明:制备的枝条菌种不仅菌丝的生长速度较快,长势好,而且出菇产量也高;以棉籽壳为主要培养基质的菌种虽然菌丝的生长速度稍慢,但长势好,出菇产量也较高,棉籽壳的配比有待进一步的调节;麦粒种的菌丝生长速度快,菌丝浓密洁白,但菌种易老化,出菇产量相对较低;而分别以木屑、菌草、蔗渣为培养基质主料的菌种质量较差。杏鲍菇菌种的培养基最适宜的料水比(料为纯干料,不包含原料中的水)应控制在1:1.7。最适pH为6.2-6.5,最适的培养温度为25℃;金针菇菌种的培养基适宜的料水比为1:1.5, pH在本试验的酸碱度范围内菌种质量无明显差异,最适生长温度为20℃,金针菇F0005和F0030菌种的培养条件略有差异。试验结果还表明了:培养温度的较小幅度的调节刺激,反而能提高菌丝对环境的适应能力,从而提高菌丝的活力及提高了菌种的质量。对于杏鲍菇和金针菇菌种,保藏80天的菌种仍可应用于生产,对出菇产量的影响没有显著差异。2.菌种纯度检测技术以正常无污染的金针菇菌种为材料,分别接种不同浓度的大肠杆菌,使之形成隐性污染。采用4种方法对隐性污染菌种进行检测,结果表明:平板涂布和液体培养法都能检测到1.5×10~3个细菌/15g菌种,即每克菌种中含有100个细菌,而划线法和快速煮沸PCR检测方法只能检测到1.5×10~5个细菌/15g菌种,即每克菌种中含有10000个细菌。以杏鲍菇为材料,对菌种的内生病毒进行检测,病毒的检测采用dsRNA提取技术和酶切验证,结果显示阳性对照中检测到了dsRNA,而杏鲍菇菌种中未检测到,说明此方法能够用于杏鲍菇病毒的检测。3.菌种保藏时间检测技术以不同保藏时间的菌种为材料,测定了几个与菌种保藏时间及活力相关的生理生化指标,结果表明:80天保藏时间以内的金针菇和杏鲍菇菌种在外观形态上有差异,但在菌种菌丝萌发的菌落形态及显微形态上都没有明显的差异。在测定的11种酶活中,其中淀粉酶、CMC酶、木聚糖酶及酸性磷酸酶酶活和杏鲍菇菌种的保藏时间存在极显著负相关,即酶活随着菌种保藏时间的增大呈下降趋势。漆酶及多酚氧化酶酶活和杏鲍菇菌种的保藏时间存在极显著正相关,即酶活随着菌种保藏时间的增大呈上升趋势。而CMC酶、木聚糖酶及丙二醛含量、菌种的酸碱度和金针菇菌种的保藏时间存在显著正相关,即酶活随着菌种保藏时间的增大呈上升趋势。淀粉酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶酶活和金针菇菌种的保藏时间存在显著负相关,即酶活随着菌种保藏时间的增大呈下降趋势。BTB能够直观地指示出金针菇菌种酸碱度的变化情况。菌种的耐高温能力检测中,随着菌种保藏时间的增大,菌种的耐高温能力逐渐减弱。在对杏鲍菇菌种的抗诱变能力检测中发现,随着菌种保藏时间的增大,母种的抗诱变能力明显减弱,而原种的抗诱变能力较强,但从萌发菌丝的生长速度来看,随着菌种保藏时间的增大,原种的抗诱变能力也有所减弱。
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