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花生是重要的食物变应原。花生过敏反应因其潜在的危险性、长期慢性反应以及不断增加的发病率而日益受到重视。花生过敏反应可发生在各个年龄段,轻可出现口腔粘膜过敏、皮肤荨麻疹等,重可出现危及生命的严重咽喉水肿、急性哮喘、过敏性休克,甚至导致死亡。目前研究已初步证明花生是由多组份变应原组成,对其中少数主要变应原的理化特性及免疫学特征也有一定的认识。但距完全了解花生变应原中各个致敏组份还相差很多。 本研究利用PBS溶液,提取去脂花生,经膜包分子筛和冷冻干燥等技术,得到花生变应原。从门诊病人中收集典型的花生过敏病人20例。花生过敏诊断主要结合典型的食物过敏病史,皮肤点刺试验阳性以及RAST FEIA测出的特异性IgE重度升高,个别病例辅以食物激发试验加以确诊。利用其中8例花生高度过敏病人血清组成的血清池,采用带有质控保证的Pharmacia CAP System进行了花生变应原的RAST inhibition试验,结果显示生花生和熟花生(以烤花生为例)抗原二者产生的RAST inhibition线的斜率分别为0.53和0.51,t检验P>0.05,两者达到50% inhibition所需的抗原量分别为33.9μg和30.2μg,熟花生抗原强度稍高于生花生,加热也许有利于增强花生抗原与IgE的结合。但总体而言,生花生和烤花生二者的抗原性效价无显著差异,是基本接近一致的。 同时还对花生变应原进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Immuno-blot)分析。实验结果:SDS-PAGE表明,花生变应原至少含有14条蛋白区带,其中以63kd、41.7kd、39kd、34.8kd、和17.9kd等5条带蛋白含量最丰富。免疫印迹显示:花生变应原中有