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背景:肿瘤的发生是一个多步骤过程,涉及许多遗传和表观遗传改变。越来越多的证据表明,肿瘤发生过程中获得的基因组改变有助于肿瘤细胞逃避免疫监视。真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)是一种翻译因子,它在翻译的起始和延伸中具有重要的功能。此外,它还涉及转录,mRNA转换和核质转运。最新研究表明EIF5A2蛋白参与多种肿瘤的发生和发展,但在胆囊癌中作用未见报道。因此,本文研究了EIF5A2蛋白的表达与胆囊癌不同临床特征之间的关系,并对患者进行中医辨证分型,分析它的临床意义,并进一步探讨了EIF5A2对胆囊癌细胞系的影响,从而为胆囊癌治疗奠定理论基础。目的:利用免疫组化染色法检测EIF5A2在不同胆囊癌组织中的表达情况,并探讨EIF5A2对胆囊癌的发生、发展和预后的影响;也从细胞水平探讨EIF5A2对胆囊癌细胞系生物学功能的影响。从而为临床诊断、治疗、预后提供理论依据。方法:(1)选择2014年01月至2017年05月在天津市南开医院实行的40例胆囊癌切除术的石蜡包埋标本;另外从上海芯超生物科技有限公司购买胆囊癌组织芯片(含40例患者)。收集以上患者相关临床病理资料,本研究还对患者进行中医辨证分型,分析中医辨证分型的临床意义。对以上标本行免疫组化染色,并分析EIF5A2蛋白的表达对胆囊癌发生发展的影响。(2)分析胆囊癌患者的临床病理资料与预后的关系,主要利用统计学的方法。采用Keplan-Meier法进行单因素分析,采用Cox回归模型对资料进行多因素分析,对胆囊癌患者进行生存分析,从而为临床诊断、治疗和判断预后的评估提供依据。(3)用si-RNA小干扰片段转染胆囊癌GBC-SD细胞系,从而干扰EIF5A2基因,并利用蛋白印迹技术和PCR技术进行敲低效率检测。(4)以敲低EIF5A2表达的胆囊癌GBC-SD细胞株为研究对象。通过平板克隆、细胞周期检测、Tranwell迁移、CFSE染色等实验技术和方法,初步探讨EIF5A2基因对人胆囊癌细胞系的迁移、细胞周期、成瘤能力、增殖等生物学功能的影响。结果:(1)将病理切片行EIF5A2蛋白免疫组织化学染色,统计分析后显示:EIF5A2表达高低与肿瘤的大小、肿瘤组织学类型、远处转移、淋巴结转移、UICC分期和分化程度有关(P<0.05),而与年龄、性别、Nevin分期以及中医辨证分型无显著性差异(P>0.05)。(2)影响患者预后的单因素分析显示:EIF5A2表达高低、组织学类型、远处转移、Nevin分期、分化程度与患者预后密切相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、UICC分期、淋巴结转移、中医辨证分型无统计学差异;Cox回归模型多因素分析显示:肿瘤分化程度、远处转移情况、EIF5A2表达情况是影响患者预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)蛋白印迹技术和PCR技术对敲低效率检测结果显示:与con-siRNA、EIF5A2-siRNA-1、EIF5A2-siRNA-2转染组相比,EIF5A2-siRNA-3转染组敲低效率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)细胞功能实验结果显示:与con-siRNA相比,EIF5A2-siRNA-3转染组抑制胆囊癌GBC-SD细胞的增殖、转移、成瘤能力、细胞周期等生物学功能。结论:EIF5A2的高表达对胆囊癌的发生、发展有促进作用,且对患者的预后产生不良影响;而对EIF5A2的敲低抑制了胆囊癌细胞系的生物学功能。所以本实验对胆囊癌的诊断、生物学治疗和预后提供了理论依据。