【摘 要】
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目的:本实验的目的是研究天然产物红景天苷和榆黄蘑多糖对酒精性脂肪肝脂肪蓄积和炎症的作用及机制。 方法:1.红景天苷体内实验部分使用C57BL/6小鼠建立酒精狂饮模型。通
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目的:本实验的目的是研究天然产物红景天苷和榆黄蘑多糖对酒精性脂肪肝脂肪蓄积和炎症的作用及机制。 方法:1.红景天苷体内实验部分使用C57BL/6小鼠建立酒精狂饮模型。通过HE染色和油红O染色观察小鼠肝脏病理变化;检测血清中ALT、AST和IL-1β的含量;通过免疫组化实验观察小鼠肝脏中NLRP3和P2x7R的表达情况。体外实验部分使用LPS刺激Raw264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞,提取细胞总蛋白和RNA,通过蛋白印迹实验和qPCR检测IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的变化。 2.榆黄蘑多糖体内实验分别建立急、慢性小鼠酒精性肝损伤模型,检测小鼠血清和肝脏中ALT、AST和TG的水平;通过HE染色、油红O染色和Masson染色观察小鼠肝脏病理变化;通过免疫组化实验检测小鼠肝脏内SIRT1、AMPKα、SREBP1和P2x7R蛋白的表达情况。体外实验部分用酒精刺激HepG2细胞,利用尼罗红染色观察细胞内脂肪含量的变化,并提取细胞总蛋白,对AMPKα和P-AMPKα的表达情况进行检测。 结果:1.体内实验中,红景天苷预处理能减轻酒精狂饮所致小鼠肝脏炎性反应相关蛋白P2x7R和NLRP3的表达,减少血清中转氨酶和促炎性细胞因子IL-1β的水平;体外实验中,红景天苷能下调LPS刺激Raw264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞导致的促炎性细胞因子IL-1β和TNF-αt的基因和蛋白水平。 2.榆黄蘑多糖在体内能减轻急、慢性酒精摄入引起的小鼠肝脏的炎症反应和脂肪蓄积,减少血清中ALT、AST和TG的含量,下调小鼠肝脏中脂肪代谢相关蛋白SREBP1以及炎症相关蛋白P2x7R的表达并增加SIRT1、AMPKα表达;在体外能够抑制酒精导致的HepG2细胞的脂肪蓄积并上调AMPKα和P-AMPKα的表达。 结论:红景天苷和榆黄蘑多糖能够明显减轻小鼠酒精性脂肪肝中的脂肪蓄积和炎性反应的发生。
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