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目的:研究沙苑子黄酮（ACF）的体内外抗肝癌作用,从整体、细胞、分子和基因水平探讨其作用机制。方法:采用MTT法和3H-TdR法观察研究沙苑子黄酮体外对肝癌细胞的抑制作用,选用小鼠肝癌H22实体瘤模型和人肝癌SMMC-7721细胞的裸鼠移植瘤模型观察研究沙苑子黄酮的体内抑制肝癌的作用;应用Hoechst 33258荧光染色、透射电镜观察、凝胶电泳和流式细胞术等方法从形态学和生化角度观察沙苑子黄酮对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用和对细胞周期的影响,基因芯片、western blots法探讨沙苑子黄酮诱导细胞凋亡的作用机制;采用MTT法观察正常条件培养基和肿瘤条件培养基下沙苑子黄酮对血管内皮细胞ECV304增殖的作用,从细胞水平探讨沙苑子黄酮对肿瘤血管内皮细胞增殖的影响,采用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型和裸鼠移植瘤组织微血管密度（MVD）分析,从体内整体水平观察沙苑子黄酮对肿瘤新血管生成的影响,进一步采用免疫组织化学方法观察沙苑子黄酮对裸鼠肿瘤组织血管生成因子VEGF及其受体Flt-1、Flk-1/KDR、Flt-4和血管生成抑制因子内皮抑素（ES）蛋白表达的影响,探讨沙苑子黄酮抑制肿瘤血管形成的作用机制;采用MTT法观察沙苑子黄酮对NK-92细胞增殖和杀伤活性的影响,流式细胞术测定NK-92细胞表型,荧光定量RT-PCR检测NK-92细胞活化受体NKP46、NKP44、NKP30和NKG2D mRNA的表达水平,以探讨沙苑子黄酮活化NK细胞的作用机制。结果:体外抑瘤试验结果显示,沙苑子黄酮对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞和小鼠肝癌Hepa1-6细胞具有明显的细胞毒作用,并且具有量效关系,作用48h的IC50值分别为26.6 mg/L和199.4 mg/L。体内模型抑瘤实验结果显示,沙苑子黄酮显著抑制小鼠肝癌H22实体瘤和人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的生长,最高抑瘤率分别可达64%和68%,使荷瘤裸鼠组织肿瘤组织坏死明显增多,肿瘤间质内血管减少,电镜下观察到典型的凋亡细胞,下调荷瘤裸鼠肿瘤组织的PCNA表达。对肝癌细胞凋亡及作用机制的研究表明,沙苑子黄酮使SMMC-7721细胞Hoechst荧光染色呈现凋亡细胞核所具有的特征性荧光斑点,凝胶电泳呈现典型的DNA ladder图谱,流式细胞检测出现明显的亚二倍体（Ao）峰,凋亡率最高达58%;基因芯片分析显示,沙苑子黄酮使SMMC-7721细胞76个基因表达产生变化,上调基因35个,下调基因41个,表达变化的基因与细胞凋亡、细胞周期和应激相关,其中上调bcl-2家族中诱导细胞凋亡的基因Bax、Bad和bik,下调抑制细胞凋亡的基因Bcl-2基因表达,上调caspase家族基因中caspase 2、3、7、8、9、10的表达,以及下调细胞凋亡其它相关基因,如PCNA、Survivin、HSP的表达,诱导和促进SMMC-7721细胞凋亡,Western bolts对cyclinB1、cyclinD1、CDK1、CDK4、caspase3、caspase8、Bax、bcl-2、P21和P27蛋白的检测结果与基因芯片分析相一致。沙苑子黄酮对经人肝癌SMMC-7721细胞上清液处理的血管内皮细胞增殖有较明显的抑制作用,而对正常状态下的血管内皮细胞毒性较低,使CAM新生血管生成受到明显抑制,ACF-a（400 mg/L）组的血管指数为67.5%,并且裸鼠移植瘤组织微血管密度（MVD）和VEGF及其受体Flt-1和Flk-1/KDR的蛋白表达明显降低,抑制肿瘤血管生成。沙苑子黄酮增强NK-92细胞增殖和杀伤活性,提高NK-92细胞表面活化分子CD25、CD69分子的表达,上调NK细胞活化受体KLRK1、NCR1、NCR2 mRNA的表达。结论:沙苑子黄酮在体内、体外具有显著的抗肝癌活性,其作用机制可能通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤组织血管形成和活化NK细胞抑制肿瘤的生长。因而沙苑子黄酮可能是一种安全有效的抗肿瘤侯选新药,值得进一步研发。