论文部分内容阅读
目的1临床观察反复玻璃体腔注射雷珠单抗对糖尿病性视网膜病变（Diabetic Retinopathy,DR）患者眼表及结膜囊菌群的影响。2动物实验探究不同方式应用雷珠单抗对糖尿病大鼠角膜新生血管（Corneal Neovascularization,CNV）的影响,明确雷珠单抗是否能透过角膜影响眼表。方法本研究包括临床研究和实验研究两部分。1临床研究选取2020年9月至2021年9月在华北理工大学附属医院眼科需行3次以上玻璃体腔注射雷珠单抗患者55例（共55眼）,分DR组及非DR组。检测首次注药前1天、首次注药后第1天及第三次注药后第7天以下参数:OSDI评分、角膜荧光染色（Fluorescein Staining,FL）评分、最佳矫正视力（Best Corrected Visual Acuity,BCVA）、眼压（Intraocular Pressure,IOP）、泪膜破裂时间（Tear Break-up Time,TBUT）及基础泪液分泌实验（Schirmer I Test,SIt）;取首次注药3天前及第三次注药3天前未使用抗生素之前结膜囊分泌物,共两次标本行细菌培养及药敏检测。2实验研究随机选取雄性SD大鼠58只,48只腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导糖尿病模型。所有大鼠喂养1月后缝线法建立CNV模型并给药,剔除造膜及给药过程中出现并发症大鼠,剩余40只大鼠进入实验研究,其中32只糖尿病大鼠及8只正常大鼠,共分五组,每组8只。具体给药方式如下,A组:非糖尿病大鼠生理盐水每日4次点眼,B组:糖尿病大鼠生理盐水每日4次点眼,C组:糖尿病大鼠结膜下注射雷珠单抗注射液0.05m L（0.5mg）,D组:糖尿病大鼠10%雷珠单抗注射液每日4次点眼,E组:糖尿病大鼠玻璃体腔注射雷珠单抗0.02m L（0.2mg）。观察大鼠造模用药后第4、7、14天角膜情况及新生血管面积,14天后处死大鼠行HE染色观察角膜组织形态及免疫组化检测VEGF-A及TNF-a蛋白表达量。结果1临床研究结果显示DR组和非DR组性别和年龄对比没有统计学意义（P＞0.05）。首次注药3天前,DR组较非DR组TBUT短、BCVA高（P＜0.05）。首次注药后第1天,两组BCVA、IOP、OSDI评分及FL评分高于注药前,TBUT变短（P＜0.05）;DR组OSDI评分及TBUT均低于非DR组（P＜0.05）。第三次注药第7天后,较术前两组患者BCVA增高、TBUT缩短（P＜0.05）。DR组较非DR组视力提升少、TBUT更短（P＜0.05）。结膜囊细菌培养显示:反复实施玻璃体腔注射雷珠单抗,DR组结膜囊细菌培养阳性率较非DR组高（P＜0.05）。2实验研究各组CNV面积对比显示,5组不同时间的CNV面积对比差异具有统计学意义（P＜0.05）,雷珠单抗结膜下注射和结膜囊点药在观察的三个时间点均可以减少糖尿病大鼠CNV的面积。造模用药后第4天,结膜下注射较局部点眼控制CNV的效果好（P＜0.05）。造模用药后第14天,糖尿病模型组较正常血糖组CNV面积小（P＜0.05）,雷珠单抗玻璃体腔注射组与糖尿病模型组CNV对比差异无统计学意义（P＞0.05）。造模用药第14天组织病理及免疫组化结果显示:各组CNV管腔主要集中在角膜浅基质层,C、D组CNV管腔较A、B、E组少。各组VEGF-A及TNF-a在角膜各层均有表达,C、D组VEGF-A和TNF-a表达量均较A、B、E组少（P＜0.05）。结论1反复玻璃体腔注射雷珠单抗,术后第一天糖尿病患者干眼症状及体征明显,三次注药后第7天干眼症状缓解,但泪膜仍不稳定,症状体征分离。反复玻璃体注射雷珠单抗围手术期用药可改变糖尿病患者结膜囊菌群。2雷珠单抗局部点眼及结膜下注射均能有效减轻CNV,但玻璃体腔注射雷珠单抗无法外渗抑制CNV。图8幅;表17个;参155篇。