多囊平对多囊卵巢综合征大鼠的药效学考察及机制研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:geng20516136
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目的:本研究通过建立多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)大鼠模型,观察临床经验方剂多囊平(Duo Nang Ping,DNP)对PCOS大鼠的干预作用并与经典方剂芍药甘草汤(Shaoyao Gancao Decoction,SGD)进行疗效比较,并探讨DNP可能的作用机制,为临床治疗PCOS提供理论和实验依据。方法:SPF级SD雌性大鼠采用连续灌胃来曲唑21 d制备PCOS模型,低、中、高剂量DNP和SGD给药14 d进行干预,观察各组大鼠体重和动情周期变化;双侧卵巢称重;ELISA法测定血清性激素(睾酮,雌二醇,促黄体生成素,卵泡刺激素,孕酮)和炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18的含量;HE染色观察卵巢组织病理学改变;实时荧光定量PCR法测定卵巢组织NF-κB炎症信号通路相关因子NF-κB p65,P-NF-κB p65,IκB-α,TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18 mRNA表达水平;免疫组织化学法检测卵巢组织TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法检测卵巢组织NF-κB p65,P-NF-κB p65,IκB-α蛋白表达水平。结果:1.与正常组相比,PCOS模型大鼠体重明显增加(P<0.05),动情周期发生紊乱,血清睾酮和促黄体生成素含量明显增加(P<0.05),而雌二醇和卵泡刺激素含量则明显减少(P<0.05),卵巢重量明显增加并发生多囊样改变,出现大量闭锁卵泡,表明模型制备成功;此外,PCOS大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18含量明显增加,卵巢组织P-NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而IκB-αmRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。2.与模型组相比,DNP组大鼠可剂量依赖性的减轻体重和卵巢重量,可使得紊乱的动情周期和性激素微环境重新恢复正常,卵巢组织结构得到明显改善。3.两中药组比较,中剂量(临床等效剂量)SGD组75%大鼠动情周期恢复正常,而中剂量DNP组大鼠则全部恢复正常,作用效果更加明显;与模型组相比,中剂量SGD组大鼠血清睾酮含量明显减少(P<0.05),而卵泡刺激素含量明显增加(P<0.05);而中剂量DNP组大鼠除睾酮、卵泡刺激素含量有改善外,还可使得血清雌二醇含量明显升高(P<0.05),促黄体生成素含量明显下降(P<0.05)。并且相较于中剂量SGD组,中剂量DNP组大鼠血清雌二醇、促黄体生成素含量改善更加明显(P<0.05),更接近于正常组。4.与模型组相比,DNP组大鼠可明显降低血清TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18含量和显著下调卵巢组织P-NF-κB p65,TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-18 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),而IκB-αmRNA及蛋白表达水平则显著上调(P<0.05)。结论:该实验结果表明DNP可以调节PCOS大鼠体内激素环境并明显改善卵巢多囊形态和功能,其作用机制可能与抑制NF-κB磷酸化,降低炎症因子水平从而改善机体慢性炎症状态有关。
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