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稻瘟病菌对全世界的水稻生产构成威胁,严重影响世界粮食安全,有关水稻与稻瘟病菌的互作机理是本领域研究热点之一。miRNAs作为一种重要的调节因子,调节着植物生长发育、抗逆抗病等。之前,我们实验室通过对感病材料LTH和抗病材料IRBLkm-Ts接种稻瘟病菌,用高通量测序检测了侵染前后miRNAs的积累量。本实验对其中三个miRNAs构建过表达株系,并检测其对稻瘟病菌的抗性及其参与的抗性通路。主要取得了以下结果：接种稻瘟病菌后,miR169a的积累在感病材料LTH和抗病材料IRBLkm-Ts中均有明显升高。对miR169a过表达植株进行滴菌和喷菌检测,表现出对稻瘟病菌抗性减弱,用qRT-PCR方法检测到OsRP10的转录水平明显低于野生型上的转录水平。用flg22和chitin处理miR169a过表达植株发现,基础抗性标记基因OsKS4转录水平没有被诱导起来,而OsNAC4的转录水平直到8hr时才达到较高的水平,因此推测miR169a对水稻早期的抗病并没有太大影响。综上所述,miR169a负调水稻稻瘟病抗性,但对水稻早期抗性没有显著抑制作用。MiR827a在LTH接菌48hr后,积累量达到0hr和12hr的10倍左右,而在抗病材料IRBLkm-Ts接菌12hr后,积累量与不接菌的对照相比,升高了3倍多。对miR827a过表达植株接菌后发现,过表达植株较野生型表现出抗性增强,OsPR10基因在接菌48hr后,转录水平显著高于野生型。用flg22和chitin处理miR827a过表达植株后发现,在受到flg22处理后,基础抗性标记基因OsNAC4和OsKS4的转录水平显著高于对照材料TP309上的转录水平；在受到chitin诱导8hr后,基础抗性标记基因OsNAC4的转录水平显著高于对照材料TP309上的转录水平。上述结果提示miR827a通过正调PTI(早期)抗性和后期抗性来增强水稻对稻瘟病菌的抗性。MiR167d在LTH中的诱导表达量要高于IRBLkm-Ts。对miR167d过表达株系进行接菌鉴定,发现miR167d过表达植株较野生型更加感稻瘟病菌,同时OsPR10诱导转录水平明显低于野生型中的转录水平。用flg22和chitin处理miR167d过表达植株后,检测到OsKS4的转录水平与野生型中相比没有明显差异,但OsNAC4的转录水平则明显高于野生型中的转录水平。因此我们推测miR167d负调控了水稻对稻瘟病菌的抗性,但miR167d对水稻的PTI反应有部分的促进作用。AtRPW8.1是拟南芥中的一个广谱抗性蛋白。我们检测了AtRPW8.1异源表达的转基因水稻中RPW8.1对水稻稻瘟病抗性的影响。通过对T3代RPW8.1转基因植株进行接菌鉴定,发现接菌后RPW8.1的转录水平和蛋白积累量都明显提高,证明外源蛋白RPW8.1在水稻中可以受稻瘟病菌诱导表达。抗病性鉴定发现转基因水稻对稻瘟病菌表现明显抗性,抗性标记基因OsPBZ1和OsPR10基因的转录也显著高于对照材料中的转录水平,说明RPW8.1可以正调水稻稻瘟病抗性。进一步用flg22和chitin处理RPW8.1转基因植株后,检测到RPW8.1的转录水平和蛋白积累量明显升高,同时基础抗性标记基因OsNAC4的转录水平也明显高于野生型中的转录水平。综上所述,我们推断RPW8.1可以在水稻中异源诱导表达,增强水稻对稻瘟病菌的抗性。