论文部分内容阅读
目的:探讨慢性低02高C02对大鼠皮层和海马神经细胞凋亡的诱发作用及对Bcl-2、Bax基因表达的影响。
方法:将清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠50只,体重180-220g,随机分成5组:即正常对照组(NC,n=10)、低02高(2021周组(1HH,n=lO)、低02高C022周组(2HH,n=10)、低02高CO23周组(3HH,n=10)和低O2高COd周组(4HH,n=10)。将后4组大鼠置于常压低02高C02舱内,通过N2调节降低舱内02:浓度使其维持在9%-11%,C02浓度为5.5%一6.5%,每天8小时,每周6天。对照组大鼠除吸入空气外,其它条件与后4组相同。动物饲养到规定时间后,用戊巴比妥钠(35mg/kg体重)腹腔麻醉,(1)采用右心导管法测量平均肺动脉压力(mPAP),左颈总动脉插管测平均颈动脉压力(mCAP),分别称取右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV+S)的重量,以RV/(LV+S)的重量比,作为右室肥大的指标。(2)采用原位末端标记法(Tunel法)检测皮层和海马区细胞凋亡指数(AI)。(3)PT-PCR方法检测皮层和海马区Bcl一2和BaxmRNA的表达。(4)电镜下观察皮层和海马区神经元超微结构的变化。
结果:
(1)低O2高CO2各组mPAP和RV/(LV+S)均高于正常对照组(均P<0.01);mPAP和RV/(LV+S)在低02高C022周时达最高,3—4周渐趋稳定。各组间mCAP无显著性差异(均P>0.05)。
(2)TUNEL染色发现,低02高C02各组皮层和海马AI均明显高于正常对照组(均P(O.01);正常对照组皮层和海马神经细胞凋亡少见。
(3)RT-PCR检测显示,低02高C02各组皮层及海马区Bcl一2和BaxmRNA表达较正常对照组明显上调(均/KO.01)。随着低02高C02时间延长,BaxmRNA表达逐渐增加;Bcl-2mP,NA表达则先升高而后下降;Bcl-2/Bax比值的变化趋势同Bcl-2。
(4)透射电镜检查发现,1HH组皮层及海马神经元无明显改变,2HH、3HH及4HH组皮层和海马出现神经元凋亡和变性,且随着低02高C02时间延长改变越明显。
(5)Pearman相关分析显示,皮层和海马区凋亡指数(AI)与BaxmRNA表达呈正相关关系(/KO.01),与色c1-2/Bax比值呈负相关关系(/2<0.01)。
结论:
(1)慢性低02高C02可以诱发大鼠皮层和海马神经细胞凋亡,且随着低02高C02暴露时间的延长细胞凋亡逐渐增多。
(2)慢性低O2高CO,可使大鼠皮层和海马神经细胞Bcl一2基因表达下调,Bax基因表达上调,Bc卜2/Bax比值下降。
(3)慢性低02高C02可能通过上调Bax基因表达和下调Bcl一2/Bax比值,从而导致皮层和海马神经细胞凋亡。