光子线照射及顺铂对趋化因子受体CCR7在宫颈鳞癌组织及细胞中表达的影响

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目的:1.检测宫颈鳞癌Siha细胞株受不同X线剂量照射、不同浓度顺铂(DDP)及同步X线+DDP处理后CCR7表达量的变化;分别比较三种干预对宫颈癌Siha细胞的CCR7表达的影响。2.检测宫颈鳞癌患者在不同放疗阶段,组织细胞中趋化因子受体CCR7表达变化;进一步探讨放射治疗对CCR7表达的影响。方法:1.单次不同剂量X线照射(0Gy、2Gy、10Gy、20Gy、30Gy)或不同浓度顺铂(0μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)作用于Siha细胞株24h、48h后,用western blot的方法检测Siha细胞中CCR7的表达量变化。2.同步2Gy X线照射+不同浓度顺铂(0μg/ml、0.1μg/ml、5μg/ml、20μg/ml)与单纯同浓度顺铂药物处理Siha细胞48h后,比较各自CCR7表达水平的差异。3.收集12例病理诊断明确的宫颈鳞癌患者,分为:①三维调强适形放疗(Intensity Modulation Radiation Therapy, IMRT)组;②常规放疗(radiotherapy, RT)+后装放疗(brachytherapy, BT)组。在与患者签订知情同意书的前提下,IMRT组采用6MV、X线连续放疗至以下各剂量点:0Gy、4Gy、12Gy、22Gy、30Gy,RT+BT组则为6MV X线和γ射线放疗剂量之和达到0Gy、4Gy、16Gy、34Gy、42Gy、57Gy的剂量点时,钳取少量瘤组织标本,置于液氮中冻存,采用western blot的方法对标本进行CCR7蛋白的检测。结果:1. Siha细胞株受单次不同剂量X线照射后24h,2Gy、10Gy及20Gy组CCR7的表达较对照组和30Gy组均增加(P<0.05),30Gy组与对照组间无统计学差异;照射后48h,2Gy及10Gy组CCR7表达量较对照组增加(P<0.05),而对照组、20Gy及30Gy各组间没有统计学差异;单次照射10Gy、20Gy后,48h的CCR7表达量较同剂量24h降低(P<0.05)。2. Siha细胞经不同浓度顺铂药物处理24h后,1μg/ml、2.5μg/ml、10μg/ml组的CCR7表达量较对照组和20μg/ml组均明显增加;48h后,0.1μg/ml、5μg/ml和10μg/ml组的CCR7表达量较对照组均明显增加,20μg/ml组较对照组CCR7的表达量显著降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。20μg/ml顺铂作用于Siha细胞48h后的CCR7表达量较24h明显降低。3.同步0.1μg/ml顺铂+2Gy组CCR7的表达量较同浓度顺铂组显著增加,而同步20μg/ml顺铂+2Gy较同浓度顺铂组CCR7的表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。4. IMRT组:22Gy、30Gy组CCR7表达量较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),4Gy与12Gy组CCR7的表达虽高于对照组,但两两比较组间没有统计学差异。RT+BT组:16Gy组CCR7表达量较对照组增加,43Gy、57Gy组较对照组均有明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.单次低剂量X线照射(2Gy、10Gy)可使Siha细胞株中CCR7表达量的增高,但高剂量(30Gy)没有明显下调CCR7的表达水平。2.低浓度顺铂可促进Siha细胞中CCR7的表达,而高浓度顺铂可抑制Siha细胞CCR7的表达。3.同步高剂量顺铂+X线照射较单纯顺铂能更好的抑制Siha细胞CCR7的表达;而同步低剂量顺铂+X线照射则可能上调CCR7的表达水平。4.宫颈癌放疗的中早期阶段,组织CCR7的表达量增加,而后期阶段CCR7表达显著降低。
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