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目的目前女性产后抑郁的数量呈明显上升趋势,国内外越来越多的学者对其进行研究。由于产后抑郁发病机制复杂,经大量研究证实体内的激素水平急剧变化是产后抑郁发生的生物学基础,雌激素低下是其病因之一。但目前尚未有对产后抑郁与雌激素、神经信号传导通路相关性的研究报道。“参归仁合剂”为成都中医药大学附属医院的临床经验方,由人参、当归、酸枣仁组成,具有补益气血,大补元气,宁心安神之功效。本课题针对产后抑郁“气虚血虚血瘀”病证,提出“补虚化瘀法”治疗产后抑郁,并进一步研究参归仁合剂对其的作用机制,即对产后抑郁大鼠脑组织ERK1/2通路中MEK1的影响。利用雌激素水平关系与神经信号传导通路中MEK1的表达量看是否达到改善抑郁症状,这是本课题一大创新点,也为中医药治疗产后抑郁提供科学依据,更为开发新药奠定基础。方法采用薄层鉴别（TLC）对其人参、当归、酸枣仁进行定性分析,高效液相色谱法（HPLC）对人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1进行含量测定。采用去势手术造模,观察其行为学指标变化,并用Western-blot法检测产后抑郁大鼠额叶、海马、下丘脑组织ERK1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2,细胞外信号调节激酶）通路中P-MEK1（phospho-mitogen-activated extracellular regulated kinase1,磷酸化丝裂原活化细胞外调节激酶）、MEK1（mitogen-activated extracellular regulated kinase1,丝裂原活化细胞外调节激酶）的蛋白表达量。1.参归仁合剂制备工艺研究参归仁合剂中三种饮片前期已对其分别进行了L9（34）正交试验,并确定其最佳提取工艺。结果显示人参的醇提工艺:用8倍量70%乙醇浸渍提取3次,每次1 h;当归的共水蒸馏提取工艺:用12倍量水浸泡12 h,共水蒸馏10 h,收集挥发油;酸枣仁的水提工艺:加10倍量水煎煮提取三次,每次1 h。酸枣仁水提液进行沉淀,其酸枣仁皂苷A的损失量较少。实验结果表明其制备工艺稳定可行。2.参归仁合剂质量标准研究分别对人参、当归、酸枣仁进行TLC鉴别,其分离效果好、阴性对照无干扰。以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量为指标,采用HPLC进行含量测定。色谱分析条件:迪马Diamosil C18（250 mm×4.6 mm,5 um）色谱柱,流动相为乙腈-水,两相梯度洗脱,柱温:25℃,流速:1 mL·min-1,检测波长:203nm,进样量:10μL,理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计算不得低于6000。3.参归仁合剂对产后抑郁大鼠脑组织ERK1/2通路中MEK1的影响（1）150只雌性大鼠进行矿场实验,将合格大鼠随机分为空白组16只和模型组121只。模型组对其进行双侧卵巢切除术,术后第2-5天进行阴道细胞学涂片检查。将合格大鼠连续16天注射苯甲酸雌二醇和黄体酮,模拟大鼠“怀孕”状态,即模型组出现抑郁倾向。对造模后的大鼠随机分为6组,每组16只。即为空白组、PPD（Postpartum Depression,产后抑郁）模型组、舍曲林组、雌二醇组、参归仁高剂量、中剂量、低剂量组。每组分别按相应的药物（双蒸水、双蒸水、舍曲林、雌二醇、参归仁）对其进行灌胃,且设1、2、4周观察时点,分别对所有组进行行为学测试,包括糖水消耗实验、旷场实验和强迫游泳实验,观察其指标变化。（2）对所有大鼠灌胃30天,取出各组大鼠脑组织中的下丘脑、海马、额叶,放-80℃备用。Western-blot法检测其P-MEK1、MEK1的蛋白表达量,用ImageJ软件检测条带的灰度值,并用P-MEK1的灰度值比上对应蛋白MEK1的灰度值,数据结果用GraphPad Prism 5软件进行分析。结果（1）建立了人参、当归、酸枣仁的薄层色谱鉴别方法,特征图谱明显,专属性强,人参皂苷Rb1、Re、Rg1分别在0.44804.480μg、0.46844.684μg、0.44264.426μg范围内与其峰面积线性关系良好,方法学考察及RSD均达到标准。（2）造模后抑郁模型组各时点大鼠体重增加缓慢,旷场实验水平运动、垂直运动得分、中央格停留时间显著延长,糖水消耗量明显下降,与空白组比较,差异有显著性（P<0.001）;参归仁高剂量、中剂量、低剂量组和阳性对照组各项指标与抑郁模型组比较均有明显改善,差异有显著性（P<0.001或P<0.01）。（3）蛋白免疫印迹显示抑郁模型组额叶、海马、下丘脑细胞内的P-MEK1、MEK1蛋白表达量明显下降,参归仁高剂量、中剂量、低剂量组额叶、海马、下丘脑细胞内的P-MEK1、MEK1蛋白表达量显著增加,尤其以参归仁中剂量、低剂量组增加较为明显。结论（1）利用TLC对其定性鉴别,其专属性强;HPLC对人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量测定,该方法简便、可行,精密度高,重复性好,适合参归仁合剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量的质量控制。（2）产后抑郁大鼠表现出抑郁样行为,且参归仁合剂能够改善其行为学指标,具有抗抑郁作用。（3）参归仁合剂在一定程度上调ERK1/2信号通路P-MEK1、MEK1的蛋白表达量,且中剂量、低剂量组效果显著,提示参归仁合剂作用机制是通过调控ERK1/2通路并达到改善抑郁症状。