论文部分内容阅读
本文以红花山桃、筑波5号、光核桃为试材,在建立稳定高效的桃离体快繁体系的基础上,同时建立了以红花山桃胚轴、子叶、增殖叶片、再生叶片为外植体的离体再生体系,并对其再生过程中内源激素含量的变化进行了分析,以期探讨内源激素的作用机制并对桃组织培养中外源激素的合理添加提供理论依据。主要结果如下：1.建立并优化了以红花山桃、筑波5号、光核桃茎段为外植体的离体快繁体系。结果表明：最佳外植体消毒方法为75%酒精浸洗30s,0.1%HgCl2+吐温浸洗7min,清水冲洗6次；红花山桃最佳取材时间3-4月,筑波5号最佳取材时间4-5月,光核桃最佳取材时间3-5月；三种桃的最佳取材部位为树冠下部；红花山桃和光核桃最佳继代增殖培养基为LP+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,筑波5号最佳最佳继代增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L;红花山桃和光核桃适宜的生根培养基为1/2MS+IAA1.0mg/L+NAA1.0mg/L,筑波5号生根困难。2.以红花山桃胚轴、子叶、增殖叶片、再生叶片为外植体,了解影响桃再生的因素,初步建立了桃再生体系。试验表明：红花山桃胚轴的形态学上部其再生率和外植体再生不定芽平均数量均比下部高。将胚轴接种至再生培养基LP+TDZ3.0mg/L+NAA0.1mg/L,暗培养7d后转入光下培养,胚轴再生率可达46.53%；将子叶预培养21d,接种至再生培养基MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.5mg/L,子叶再生率可达30.76%；将1.0-2.0cm的增殖叶片远轴面接触再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+NAA0.05mg/L+葡萄糖,暗培养21d后转入不含生长素的再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+葡萄糖,光下培养,增殖叶片再生率可达29.70%,不定芽平均再生数为1.87；将1.0-2.0cm的再生叶片远轴面接触再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+NAA0.05mg/L+葡萄糖,暗培养21d后转入不含生长素的再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+葡萄糖,光下培养,再生叶片再生率可以达到36.34%,不定芽平均再生数为2.18。3.酶联免疫吸附法测定桃离体培养过程中不同发育阶段各外植体内源激素含量变化的研究,明确了影响桃不定芽再生的内源激素。结果表明：不同桃组培苗的内源激素含量不同,含量高的桃(如红花山桃)具有较高的增殖系数；GA和IAA共同作用促进愈伤组织的生长；不定芽的分化与ZR/IAA的比例有密切关系,ZR/IAA的比值大有利于诱导芽的分化。