XRCC1缺陷细胞株的建立及其对氢醌毒作用的影响

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DNA损伤是遗传物质及环境污染物引起遗传效应和癌变的早期指标。碱基切除修复是机体一种主要的修复系统,其中XRCC1是此系统中主要修复因子之一,在DNA损伤修复中发挥着重要的作用。XRCC1(X-ray cross complementing group1)是一种重要的DNA修复基因,它编码的蛋白质虽然没有直接的催化活性,但是其不仅与DNA聚合酶β(Pol β)、DNA连接酶Ⅲ(Lig3 α)、聚(二磷酸腺苷-核糖)多聚酶(PARP)和脱碱基内切核酸酶(APE)结合形成复合体,而且多聚核苷酸激酶(PNK)相互作用,发挥重要的支架蛋白的作用,参与碱基切除修复和DNA单链断裂修复。RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是目前最有效的基因沉默技术,能特异性抑制靶基因的转录,进而下调相应蛋白水平及功能。氢醌(HQ)是苯的一种代谢产物,其可引起DNA的烷化损伤和断裂损伤,它所导致的DNA损伤是通过碱基切除修复(BER)途径进行修复的。本研究通过构建XRCC1基因的发卡样siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,观测对XRCC1基因的沉默作用及建立XRCC1缺陷的细胞株,并初步研究XRCC1蛋白缺陷细胞株对氢醌毒作用的影响。
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