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目的:
本实验通过大黄素、氟伐他汀对糖尿病大鼠的干预试验,观察对糖尿病大鼠肾脏病变有重要影响的细胞因子CTGF在肾脏表达的变化,探讨CTGE在糖尿病肾病进展中的作用,以及大黄素和氟伐他汀肾脏保护作用的机制。
方法:
将SD二级雄性大鼠120只,随机分为:正常对照组(N组)、糖尿病模型对照组(D组)、糖尿病大黄素治疗组(E组)、糖尿病氟伐他汀治疗组(F组)、糖尿病氟伐他汀大黄素联合治疗组(FE组)。由大鼠尾静脉单次注射链脲佐菌素(60mg/kg),造成糖尿病大鼠模型。第2、4、8周分别取各组的1/3大鼠收集标本,用生化方法测定血糖、血胆固醇、血尿素氮、血肌酐及24小时尿蛋白定量;用RT-PCR检测肾皮质CTGFmRNA表达,免疫组化检测肾组织CTGF蛋白表达水平。
结果:
(1)血糖、血胆固醇、血尿素氮及肌酐之间比较:所有糖尿病大鼠经尾静脉注射STZ60mg/kg后,血糖迅速上升,>16.7mmol/L,说明糖尿病模型是成功的。在第4、8周时,D组血胆固醇高于N组(P均<0.01),第8周时F、FE组血胆固醇低于D组(P<0.05).各治疗组之间的血尿素氮、血肌酐值比较无统计学差异。
(2)24h尿蛋白定量之间比较:从第2周开始,所有D组的24h尿蛋白定量均高于N组(P<0.01).E、F组在第8周时24h尿蛋白定量低于D组(P<0.05),FE组第4、8周尿蛋白定量均低于同周D组(P<0.01)。
(3)各组CTGF蛋白表达比较:免疫组化结果显示糖尿病大鼠第2、4、8周肾组织CTGF蛋白表达均高于同周N组(P<0.01)。在第2周时,F组(P<0.05)、FE组(P<0.01)CTGF蛋白表达低于同周D组;第4、8周时,E、F、FE组CTGF蛋白水平表达均低于同周D组(P<0.01).在第2、4、8周FE组CTGF蛋白表达低于同周E组(P<0.05);在第4周,FE组CTGF蛋白表达低于F组(P<0.05)。
(4)各组CTGFmRNA表达比较:RT-PCR结果显示糖尿病大鼠第2、4、8周肾组织CTGF mRNA表达均高于同周N组(P<0.05)。在第2周,FE组CTGFmRNA表达低于同周D组(P<0.05);第4、8周,E、F、FE组CTGFmRNA表达均低于同周D组(P<0.01)。各周E、F、FE组两两之间相比无统计学差异。
结论:
糖尿病大鼠肾组织CTGF基因在mRNA和蛋白水平表达增加。大黄素和氟伐他汀干预后,糖尿病大鼠肾脏组织CTGF表达下降,尿蛋白排泄减少。大黄素、氟伐他汀可能通过下调糖尿病大鼠肾脏CTGF表达而达到肾脏保护作用。大黄素与氟伐他汀联合使用后仅有部分协同作用。