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糖类是细胞和动物体的营养物质,过度摄入糖类会导致肝脏脂质沉积。葡萄糖、果糖、蔗糖常用作糖脂代谢疾病模型的诱导剂,但它们通过什么途径诱导脂质沉积并不十分清楚。由于鹅肝具有肝脂质沉积上的特殊性,鹅短期填饲可以进行肥肝生产,用不同糖类培养鹅原代肝细胞,可对鹅肥肝生产提供一定的理论基础,也可一定程度反映天府肉鹅母系的肥肝性能。本试验通过分离培养鹅原代肝细胞,加入不同浓度的葡萄糖、果糖、蔗糖进行培养,又在糖类处理的基础上加入内质网应激抑制剂4-PBA,然后采用荧光定量PCR、ELISA试剂盒以及油红O染色检测脂肪酸合成、脂肪酸氧化、脂质转运的相关指标来反映不同糖类对脂质代谢的影响。通过分析不同糖类对内质网应激、脂肪酸合成、脂肪酸氧化、脂肪酸转运的影响,为探讨不同糖类调节鹅肝脏脂质沉积的分子机制提供依据。主要结果如下:(1)用葡萄糖、果糖、蔗糖处理鹅原代肝细胞24h,每个处理组的细胞活性均有一定的上升。油红染色可见脂滴形成显著。(2)葡萄糖和果糖相比蔗糖有较强的脂质沉积促进作用,能够上调脂质合成相关基因如FAS、ACCα的表达。浓度越高,上调的作用较明显;果糖对脂质合成的促进作用弱于葡萄糖。三种糖类对SREBP-1基因表达都无显著作用。蔗糖对FAS、ACCα的表达均不显著。说明果糖、葡萄糖通过增加脂肪酸合成来增加脂质沉积,蔗糖对脂肪酸合成的作用不显著。(3)葡萄糖、果糖、蔗糖处理不能促进脂肪酸β氧化相关基因如ACOX1和PPARγ的表达(P>0.05)。果糖能够促进PPARα的基因表达(P<0.05);50mmol/L果糖、50mmol/葡萄糖、30mmol/L蔗糖可以显著下调CPT-1的基因表达(P<0.05)。表明三种糖类都通过抑制脂肪酸氧化来增加TG聚集,蔗糖虽然没有促进脂肪酸合成的作用,但可以通过抑制脂肪酸氧化来使细胞中TG浓度增加。(4)糖处理对载脂蛋白B(ApoB)的作用不明显,基因表达和酶活都与对照组之间无显著差异。30mmol/L葡萄糖可以显著下调DGAT1的基因表达(P<0.05),其他组都与对照组差异不显著(P>0.05)。50mmol/L蔗糖可以显著下调MTP基因表达(P<0.05),50mmol/L果糖处理可以显著降低MTTP酶浓度(P<0.05)。30mmol/L葡萄糖、50mmol/L葡萄糖、30mmol/L果糖、50mmol/L果糖可以显著上调DGAT2的基因表达(P<0.05),30mmol/L蔗糖、50mmol/L蔗糖则与对照组差异不显著。三种糖类都具有通过减少脂质转运来增加脂质沉积的作用。(5)在糖类处理基础上加入内质网应激抑制剂4-PBA以后,糖+4-PBA处理诱导脂肪酸合成相关基因FAS和ACC表达量显著降低,CPT-1和MTP的表达量升高。说明三种糖类可能会通过诱导内质网应激来增加脂质沉积,降低脂质转运和氧化。综上所述,葡萄糖、果糖、蔗糖是通过增加脂肪酸合成、降低脂肪酸氧化和转运来促进鹅肝脏脂质沉积,且它们还能通过内质网应激途径来增加脂质沉积。