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第一部分:急性心肌梗死患者血浆线粒体偶联因子6的变化及其临床意义目的:本研究的目的旨在探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者血浆中线粒体偶联因子6（mitochondrial coupling factor 6,CF6）的变化及CF6与AMI临床因素的关系,以期了解CF6在AMI发生发展中的病理生理意义。方法:根据2000年欧洲心脏病学会/美国心脏病学会（ESC/ACC）制订的急性心肌梗死诊断标准中关于急性心肌梗死的诊断标准,选择新发病的80例AMI患者和90例年龄、性别相匹配的健康体检者分别作为AMI组和对照组,收集入选患者详细临床资料。所有患者于入院次日清晨抽取空腹肘静脉血测定血浆CF6水平及其他生化指标。分别分析AMI组及对照组的血浆CF6水平;分析AMI患者的血浆CF6水平与冠状动脉病变积分（CAS）的关系;分析AMI患者血浆CF6水平与AMI临床因素的关系。结果:AMI患者血浆CF6水平与对照组比较明显升高（297.70±46.15 pg/ml vs200.23±20.93 pg/ml,P＜0.01）;AMI患者血浆CF6水平随着冠脉病变积分的增加而升高（P＜0.01）;血浆CF6水平与患者年龄、性别、吸烟、收缩压及舒张压水平、血糖、肌钙蛋白I、CK-MB等指标均无明显相关关系（P＞0.05）:但与患者甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白水平正相关（P＜0.05）,相关系数分别为r=0.352、0.314和0.206。结论:AMI患者血浆CF6水平升高,并且与AMI患者冠状动脉病变积分（CAS）相关,提示CF6参与了AMI的病理生理过程。这为探索心肌细胞缺血缺氧损害机制提供了新认识。第二部分:PKC-MAPK信号转导通路在缺血缺氧致心肌细胞线粒体偶联因子6表达改变中的作用目的:在离体培养的原代乳鼠心肌细胞中,进一步研究缺血缺氧对CF6的影响。观察缺血缺氧对心肌细胞合成和分泌CF6的影响以及缺血缺氧状态下蛋白激酶C（PKC）及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路分子的活化及其对CF6合成和分泌的可能影响,以期探讨影响临床AMI患者循环CF6水平的可能机制。方法:培养的心肌细胞随机分为以下几组,即正常对照组:正常培养的心肌细胞:缺血缺氧组:Staurosprine组:缺血缺氧+staurosprine（PKC抑制剂）组:U0126组:缺血缺氧+U0126（ERK1/2特异性抑制剂）组;SB202190组:缺血缺氧+SB202190（p38MAPK特异性抑制剂）组。各实验组于相应刺激后收集标本进行检测。应用Real-time PCR方法检测心肌细胞CF6 mRNA的表达:采用放射免疫法检测培养基中CF6的含量;利用(γ-32P)ATP体外标记磷酸化方法进行心肌细胞PKC活性测定;采用Western Blots方法检测心肌细胞磷酸化ERK1/2激酶和磷酸化p38 MAPK蛋白含量。结果:心肌细胞经缺血缺氧刺激3h后CF6基因的表达增加,与相应时间点对照组相比结果有显著性差异（P＜0.01）;刺激6h后,心肌细胞中CF6基因的表达达到峰值,此后逐渐降低,在刺激12h时已接近刺激前水平。缺血缺氧刺激可时间依赖性增加心肌细胞CF6分泌水平,12h达到稳态,较对照组培养基中CF6浓度高2.33倍（P＜0.01）。PKC、ERK1/2抑制剂能够抑制缺血缺氧诱导的ERK1/2磷酸化;PKC、p38MAPK抑制剂能够抑制缺血缺氧诱导的p38MAPK磷酸化;同时发现,缺血缺氧诱导的CF6分泌增加可被PKC抑制剂、ERK1/2抑制剂和p38MAPK抑制剂所显著抑制,其抑制率分别为59.1%（P＜0.01）、56.4%（P＜0.01）和58.9%（P＜0.01）;同样这些抑制剂也能够抑制缺血缺氧诱导的CF6mRNA表达（P＜0.01）。结论:缺血缺氧刺激可上调体外培养的大鼠心肌细胞CF6的表达和分泌;PKC、ERK1/2及P38 MAPK等信号转导分子活化与心肌细胞CF6表达及释放调节有关。上述结果表明缺血缺氧是心肌细胞的内源性CF6分泌的刺激因子;对病理生理状态下CF6异常与PKC,MAPK等相关因子的关系进行深入探讨,可能具有重要理论或临床价值,可能为缺血性心脏疾病的诊断和治疗提供新的思路和方向。