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Berrelial螺旋菌pcs基因编码磷脂酰胆碱合成酶。磷脂酰胆碱合成酶能利用胆碱作底物催化合成磷脂酰胆碱。本实验旨在通过建立磷脂酰胆碱合成酶(Pcs)的大肠杆菌表达系统，让克隆的磷脂酰胆碱合成酶基因(pcs)在大肠杆菌细胞中有效地表达，并尽可能使磷脂酰胆碱成为大肠杆菌细胞膜的主要成分，为以后研究磷脂酰胆碱(PC)成分在大肠杆菌细胞膜系统中功能与作用、确立磷脂酰胆碱(PC)成分与致病细菌入侵真核细胞的关系提供一个实验平台。
根据基因库中B.burgdorferipcs基因序列设计引物pcsF、pcsR，以B.afzelii的总DNA为扩增模板，通过PCR方法扩增出705bp的磷脂酰胆碱合成酶基因(pcs)。以带有T7启动子的pET23a和tac启动子的ptac85为两种表达载体，构建了pcs基因的两种不同的表达载体pET23a-pcs和ptac85-pcs。在这两种质粒中,pcs均带有组氨酸标记。让表达载体pET23a-pcs和ptac85-pcs分别在不同的大肠杆菌细胞EcoliB121CodePlus(DE3)RIL和EcoliTop10中进行表达。带有pET23a-pcs重组质粒的E.coliB121CodePlus(DE3)RIL转化子和带有ptac85-pcs重组质粒的在含有0.4﹪(w/v)胆碱和100mg/LAmp的LB液体培养基37℃培养，并用终浓度为0.5mmol/LE.coliTop10的IPTG进行诱导。TLC鉴定到了磷脂酰胆碱合成酶的合成产物PC，但是其合成量很低，不超过细菌总磷脂数的5﹪。通过调节IPTG的使用浓度、使用时间和诱导时间，胆碱的使用浓度，以及培养基的条件，在E.coliTop10-pcs表达菌株中发现，当细菌的O.D.600达到0.8加入0.5mmol/L的IPTG进行诱导，胆碱的使用浓度为1.0﹪(w/v)，30℃诱导培养2-4小时后磷脂酰胆碱(PC)的合成量达到最大，可以占到大肠杆菌细胞膜磷脂组分的80﹪以上。
此外，为了获得pss-pcs+突变株，巳构建了自杀性载体pHB02和插有抗生素基因的磷脂酰乙醇胺合成酶基因(pss)失活片断，为采用细菌杂交方法、电转化同源重组的方法敲除Ecolipss基因作好了准备工作。