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海洋环境由于高盐、高压、低温、寡营养和无光照的特殊生态环境,使得海洋微生物具有独特的代谢途径和遗传背景,因此,它们一般能够产生特殊的活性物质,我们对海洋微生物所产生的活性物质的研究也逐渐成为开发海洋环境的首要部分之一。本课题的研究内容主要是以大连海域海参养殖圈海水及海底污泥为样品,从中筛选出抗菌活性较高的微生物,并且对该微生物所产生的抗菌物质进行了初步的研究。结果如下:(1)从大连海域海参养殖圈海水及底泥中分离得到506株海洋细菌,采用滤纸片法进行抗菌活性初筛,得到96株具抗菌活性的菌株,占到筛选总数的19%。在此基础上采用牛津杯法进行复筛,最终得到13株具有显著抑菌活性的菌株,其中2株对金黄色葡萄球菌有较强抑制作用,1株只对溶壁微球菌有较强抑制作用,5株对副溶血弧菌有较强抑制作用,5株对四种指示菌均有较强抑制作用。选取1株抑菌活性强,且对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用的菌株(命名为HS-A465)进行下一步研究。(2)对菌株HS-A465进行形态学观察、生理生化实验,同时对其16S rDNA序列在GenBank中进行比对,通过构建系统发育树确定了该菌株的在生物界的进化程度。结果表明:该菌株为海洋侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporu),其16S rDNA序列在GenBank中的检索号为KJ398346。(3)海洋侧孢短芽孢杆菌HS-A465发酵上清液经盐酸沉淀、有机溶剂萃取得到具有抗菌活性粗提物。采用薄层层析和生物显影技术检测到3种物质,采用制备型层析板制取技术对3种成分分离纯化并对每一种成分进行抑菌实验,结果发现其中有两种成分具有显著的抑菌作用。(4)对菌株HS-A465发酵液中的活性成分的理化性质进行了初步研究,该粗提物经过不同的温度、酸碱、有机溶剂和紫外线的处理,采用牛津杯法测抑菌活性。结果发现:该活性物质具有很强的热稳定性,经121℃处理后保留活性81%;该活性物质pH耐受性范围广,在pH 2-12之间均有较好的稳定性;经紫外线照射48 h抑菌活性仍保留78%;该活性物质对常见有机溶剂不敏感。