海豚链球菌是一种革兰氏阳性菌,可感染多种海水和淡水养殖鱼类,是一种重要的水产养殖病原菌。本实验室从濒死的患病牙鲆体内分离到一株细菌SF1,初步的攻毒实验表明SF1可以感染牙鲆并且显示出较强的毒力。16S序列分析SF1为海豚链球菌;通过API 20 Strep检测和随机扩增多态性DNA标记分析,确认SF1为血清型I型海豚链球菌。通过本实验室构建的一个分泌序列的捕获系统pBU自SF1筛选到一个候选抗原Sip11。将Sip11用原核表达系统在BL21(DE3)进行诱导表达,进一步将其纯化,得到重组蛋白Sip11。用牙鲆为模型动物,腹腔注射Sip11,用SF1攻毒检测其保护效率,其相对保护率为69.7%。为了克服常规亚单位疫苗的缺点以及提高Sip11的免疫效应,进一步构建了一个可将Sip11分泌到胞外的菌株DH5α/pTAS11,以DH5α/pTAS11为活体疫苗免疫牙鲆,其免疫相对保护率为100%。用ELISA检测免疫之后5到8周的血清抗体效价,Sip11蛋白免疫组和DH5α/pTAS11活体疫苗免疫组都有特异性针对Sip11的抗体产生。这些结果表明,DH5α/pTAS11可作为一个有效的抵御SF1感染的候选疫苗。