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背景:HBsAg阳性是HBV感染的重要证据。然而临床上还存在大量HBsAg阴性肝炎。有研究证实,在部份血清HBsAg阴性的个体,应用聚合酶链反应(PCR)技术可以检测出血清和(或)肝组织中HBVDNA,称之为隐匿性HBV感染。这种感染可发生于单个或者多个抗体阳性者,也可见于乙肝病毒血清学标志物(HBVM)均阴性的个体。隐匿性HBV感染同样可以通过输血、器官移植、血液透析、母婴垂直等途径传播,也会导致多种后果。例如:乙肝疫苗免疫失败、暴发性肝衰竭、慢性肝损害、与HCV重叠感染加重病情、导致肝细胞癌的发生等。目的:1、探讨不明原因肝病患者血清中与PBMC内HBVDNA的感染情况,判断两种检测方式对隐匿性HBV感染的诊断意义;2、研究隐匿性HBV感染者HBV S区基因变异情况,分析隐匿性HBV感染发生的分子生物学机制。方法:选择不明原因肝病患者76例,分离患者血清及PBMC,分为血清组与PBMC组,采用巢式PCR分别检测两组HBVDNA,阳性者结合临床资料分析,血清组阳性者测序HBV S基因序列,分析变异位点。结果:(1)血清组和PBMC组HBVDNA阳性率分别为21.05%(16/76)和9.21%(7/76),两组比较,差异有统计学意义,血清组阳性率高于PBMC组。(2)1例患者血清HBVDNA阴性,但PBMC内HBVDNA阳性。(3)7例PBMC内HBVDNA阳性者,临床诊断均为肝硬化。结合临床资料发现,PBMC组阳性者肝硬化并发症出现几率高,病情重,合并症多。(4)血清内HBVDNA阳性者随机抽取8例测序,a决定簇内序列比对发现,nt574出现A→T的突变,推导氨基酸无变化;nt587出现G→A的突变,推导至氨基酸甘氨酸变异为精氨酸,即较为常见的G145R突变。a决定簇外基因序列比对发现,nt355,nt484碱基均由A→C,推导氨基酸无变化,nt512碱基由C→A,推导氨基酸由脯氨酸变异为苏氨酸。结论:1、对于隐匿性HBV感染的诊断,血清组优于PBMC组,但PBMC内HBVDNA的检测可作为血清检测的补充。2、隐匿性HBV感染者PBMC内HBVDNA阳性与肝硬化关系密切,对判断病情进展有一定的指导作用。3、G145R突变是隐匿性HBV感染发生原因之一。