【摘 要】
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目的：本文针对抗菌肽不宜在原核系统中直接表达、而在融合表达中产率低的问题，研究抗菌肽在真核表达所必需的环节-构建抗菌肽CM4真核表达载体，为其在毕赤酵母菌中分泌表达奠定基
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目的：本文针对抗菌肽不宜在原核系统中直接表达、而在融合表达中产率低的问题，研究抗菌肽在真核表达所必需的环节-构建抗菌肽CM4真核表达载体，为其在毕赤酵母菌中分泌表达奠定基础。
方法：首先采用重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成CM4目的基因，并在此目的基因上加酶切位点，然后构建PMD19-T-CM4克隆载体。用EcoRI和NotI双酶切抗菌肽CM4基因的PCR产物及pPICZαA空载体，之后用连接酶连接得到真核表达载体pPICZαA-CM4。
结果：通过琼脂糖凝胶电泳，表明得到了抗菌肽CM4基因；经过PCR鉴定，证明构建了重组质粒PMD-19-CM4；通过酶切鉴定和测序，证明构建了真核表达载体pPICZαA-CM4。
结论：通过实验表明，按本文方法构建抗菌肽CM4基因真核表达载体是可行的。
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