人右心耳组织中阿片受体种类、分布及不同年龄段之间差异的观察研究

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目的:本研究采用免疫组化的方法直接观察检测不同年龄段人活体心脏中阿片受体的类型(δ、μ、κ受体)与分布,为进一步探讨和厘清阿片受体介导的心肌保护作用机制提供可靠的理论基础和实验依据。方法:选择因先心病或后心病拟在体外循环下行开心手术治疗的心脏病患者20例,根据不同年龄分为4组:出生至14岁为儿童组(记为C组,本组年龄分别为3月2例,1岁1例,4岁2例,共5例);15岁至44岁为青年组(记为Y组,本组年龄分别为15岁1例,17岁1例,27岁1例,28岁1例,42岁1例,共5例);45岁至59岁为中年组(记为M组,本组年龄分别为47岁2例,50岁1例,51岁1例,55岁1例,共5例);60岁至74岁为老年组(记为O组,本组年龄分别为60岁1例,63岁1例,64岁2例,69岁1例,共5例)。全身麻醉后,手术中由外科医生剪取少量右心耳组织,然后将右心耳组织进行免疫组化处理并分别检测δ(DOR)、κ(KOR)、μ(MOR)三种阿片受体的表达情况。在光学显微镜下直接观察胞浆染色程度以对免疫组化结果进行定性判断,并采用计算机免疫组化图像分析技术对免疫组化结果进行定量检测。结果:(1)光学显微镜下观察:DOR在C组为弱阳性(+),Y组为中等阳性(++),M组为强阳性(+++),O组为中等阳性(++);KOR在C组为弱阳性(+),Y组为弱阳性(+),M组为中等阳性(++),O组为弱阳性(+);MOR在C组为弱阳性(+),Y组为中等阳性(++),M组为中等阳性(++),O组为弱阳性(+)。(2)免疫组化计算机图像分析:DOR在C组、Y组、M组及O组平均光密度值分别为0.0194±0.0073、0.0449±0.0101、0.0456±0.0119和0.0415±0.0087。与C组比较,Y组、M组、O组平均光密度值较高(P<0.05),Y组、M组、O组间略有差异,但差异无统计学意义(P>0.05)。KOR在C组、Y组、M组及O组平均光密度值分别为0.0030±0.0016、0.0164±0.0032、0.0362±0.0074、0.0189±0.0058。Y组、M组及O组平均光密度值明显高于C组(P<0.05);与Y组比较,M组平均光密度值较高(P<0.05),O组平均光密度值略高,但差异无统计学意义(P>0.05);O组与M组比较,平均光密度值较低(P<0.05)。MOR在C组、Y组、M组及O组平均光密度值分别为 0.0317 ± 0.0055、0.0409 ± 0.0074、0.0498 ± 0.0084、0.0316±0.0051。与C组比较,Y组、M组平均光密度值较高(P<0.05),O组平均光密度值略低,但差异无统计学意义(P>0.05);与Y组比较,M组平均光密度值较高,O组平均光密度值较低,(P<0.05);与M组比较,O组平均光密度值较低(P<0.05)。结论:(1)人类活体心脏中存在δ、κ、μ三种阿片受体;(2)δ、κ、μ三种阿片受体在不同年龄阶段的人的心脏上分布存在差异,δ受体在青年、中年及老年阶段分布较多,在儿童阶段分布较少;κ受体在中年阶段分布最多,在青年及老年阶段较少且无明显差异,而在儿童阶段最少;μ受体在青年、中年阶段分布较多,在儿童及老年阶段分布较少且无明显差异。不足:(1)心脏组织取材部位局限、单一,虽然证实了心脏组织中的阿片受体存在情况,但尚不足以推定心脏其他部位阿片受体存在及分布情况与本文结果完全一致;(2)本研究未对心脏组织中阿片受体亚型进行观察检测。
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