猪肝脏、肌肉、尿液和血液中莱克多巴胺残留检测方法及残留消除的研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:calvinly1989718
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β-激动剂(β-adrenergic agonist)属于拟肾上腺素类药物,由于其具有促进动物生长、提高瘦肉率的作用曾被作为饲料添加剂应用于动物养殖业中,然而-激动剂在动物组织中的残留会严重危害消费者的身体健康。因此,建立β-激动剂残留检测的方法成为关系食品安全的亟待解决的问题。本文旨在建立猪肝脏、肌肉、尿液和血液中莱克多巴胺的高效液相色谱-荧光检测方法,并将其应用于连续饲喂莱克多巴胺28天后猪样品中药物残留含量的测定。同时还基于停药期间猪组织和尿液样品中莱克多巴胺的残留含量对残留预测模型进行了初探。 本研究建立了猪肝脏、肌肉、尿液和血液中莱克多巴胺的高效液相色谱.荧光检测方法。经提取,浓缩和固相萃取净化后,采用反相高效液相色谱荧光检测法进行测定。猪组织中药物的检测限为1 ng/g,尿液和血液为0.5 n/mL。在2-50 ng/g添加水平下,肝脏中药物平均回收率为76.3%-80.0%,变异系数为8.2%-11.3%:肌肉中平均回收率为78.9%-86.6%,变异系数为10.3%-13.0%。在1.50 ng/mL添加水平下,尿液中平均回收率为73.9%-80.5%,变异系数为5.4%-9.2%;血液中平均回收率为87.5%-93.8%,变异系数为6.7%-11.2%。该方法完全符合兽药残留检测方法的回收率要求和精密度要求。 本实验初步研究了连续饲喂莱克多巴胺28天后猪肝脏、肌肉、尿液和血液中药物的残留消除。50头猪连续拌料饲喂含有18 mg/kg莱克多巴胺的饲料28天。给药期间莱克多巴胺在肝脏中残留量为45.7±18.6 ng/g,肌肉中为4.04-1.0 ng/g。停药0天(给药28天)肝脏中药物含量为32.04-21.2ng/g,肌肉中为3.1±1.0 ng/g。肝脏中药物残留直至停药9天时才检测不到,而停药1天时肌肉中药物含量已低至检测限以下。尿液中,莱克多巴胺的含量在给药第7天时达到最高(650.1 ng/mL),停药0天时的浓度为125.34±4.7 ng/mL,直到停药第14天时药物含量才低于检测限。血液中药物浓度较低,给药期间达到7.24±3.0 ng/mL,停药1天时降至检测限以下。停药0天时,肝脏和肌肉中药物的残留含量均低于FDA和JECFA(Jonint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives)建立的tolerance和MRL(Maximum Residue Limit)。 同时还基于停药期间猪组织和尿液样品中莱克多巴胺的残留含量对残留预测模型进行了初探。初步研究了停药时间点1,2,3,7,9,14天和猪样品(肝脏、肾脏和尿液)中莱克多巴胺残留浓度的相关性,肝脏中药物含量和停药时间点的拟合方程为y<,L>=7.0859x<-0.6274>,R<2>=0.81;肾脏的拟合方程为y<,K>=13.023x<-0.577>,R<2>=0.96;尿液的拟合方程为y<,U>=32.955x<-1.7786>,R<2>=0.93。也对由尿液中莱克多巴胺的含量推测组织中药物的水平进行了初步探索。肾脏和尿液中药物浓度的拟合方程为y<.K>=4.2651 y<,U><0.3116>R<2>值为0.96;肝脏和尿液中药物浓度的拟合方程为y<,L>=1.1588 y<,U><0.5858>,R<2>值为0.87。结果表明由尿液中药物残留量推断肾脏中的药物水平比尿液推断肝脏中药物浓度更接近真实情况。对于拟合预测的结果和实测结果的T检验显示,差异不显著(P>0.05)。因此,曲线拟合和回归分析均满足统计学的要求。在停药0天时肝脏和肾脏中莱克多巴胺的预测值均低于FDA建立的Tolerance和JECFA建立的MRL。
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