目的:研究曲安奈德浓度变化对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞(HFB)增殖及凋亡的影响,初步探讨其治疗增生性瘢痕的作用机制,并得出抑制瘢痕成纤维细胞增殖的有效药物浓度范围,为临床用药提供参考依据,指导临床治疗。方法:1.临床收集增生性瘢痕组织。2.采用组织块法对HFB进行体外原代培养,传代纯化。3.采用形态学及免疫组织化学(抗波形蛋白抗体)方法对HFB进行鉴定。4.用不同浓度的曲安奈德处理HFB 24h、48h、72h;采用不加药培养基为阴性对照。5.采用四唑盐(MTT)比色法检测HFB增殖活性并计算IC50、IC95。6.电子显微镜及原位标记法(Tunel法)检测凋亡。计算AC50、AC95。结果:1. HFB的鉴定HE染色后光镜下观察见细胞胞体呈典型的梭形或三角形,有2～3个长短不一的突起,胞核椭圆形,核位于胞体中间,胞体淡红,胞核淡蓝色。抗Vimentin染色阳性,胞浆内见大量棕黄色颗粒,衬染的核呈蓝色。结合细胞的生长特性及上述形态学特征,以及临床诊断,确认所培养的细胞为增生性瘢痕成纤维细胞。2.曲安奈德对HFB增殖的影响MTT法显示:一定浓度的曲安奈德对HFB的增殖有明显抑制作用。其抑制作用具有明显的浓度时间依赖性:在一定范围内,曲安奈德浓度越高,对细胞的生长抑制率越高(P<0.01);药物作用时间越长,抑制率越高(P<0.01)。其24h、48h、72h的IC50分别为0.42g/L、0.21g/L、0.10g/L;其24h、48h、72h的IC95分别为2.05g/L、0.96g/L、0.64g/L