氧化应激所致乳鼠心房肌细胞凋亡的实验研究

来源 :内蒙古民族大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuhaoxust
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目的:通过建立原代培养乳鼠心房肌细胞氧化应激(oxidative stress)模型,并检测凋亡相关因子,研究氧化应激对原代培养乳鼠心房肌细胞凋亡及其信号传导通路的影响,探讨氧化应激与乳鼠心房肌细胞凋亡之间的相关性,有望为心房颤动(atrial fibrillation,AF)的发病机制及临床治疗提供理论依据。  方法:分离并培养乳鼠心房肌细胞,免疫组织化学方法鉴定培养细胞为乳鼠心房肌细胞。将培养细胞分为对照组、氧化应激模型组,对照组为培养的原代乳鼠心房肌细胞,模型组在培养的原代乳鼠心房肌细胞中加入终浓度为100μmol/L的H2O2溶液培养2h,检测氧化和抗氧化指标的变化。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测2组心房肌细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;末端标记法(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)检测2组心房肌细胞凋亡情况;蛋白质免疫印迹试验(Western Blotting)检测2组心房肌细胞Kv1.5钾通道、内质网网腔钙结合蛋白(calumenin)表达情况。  结果:与对照组相比较,模型组心房肌细胞SOD活力下降,MDA含量增加,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组相比较,模型组心房肌细胞凋亡增加,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组相比较,模型组心房肌细胞Kv1.5钾通道表达增加,calumenin表达减少,差异有统计学意义(P<0.01)。  结论:氧化应激反应可能通过降低calumenin表达,介导内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应,从而影响凋亡相关因子表达,引起心房肌细胞凋亡增加。这可能与心房颤动的发生有一定关联性。
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