膀胱癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤，绝大多数来源于上皮组织，其中90﹪以上是移行细胞癌(transitional cell carcinoma，TCC)。初发的膀胱癌可分为表浅性和浸润性两种不同的行为表现。近年来其发病率有上升的趋势，严重危害人们的健康。膀胱癌的发生、发展是多因素、多基因和多步骤的病理变化过程，其确切的发病机制到目前为止仍未阐明。近年来研究发现“控制脊椎动物胚胎发育的信号通路可能与人类肿瘤有关”，一个与胚胎发育密切相关的信号通路——Hedgehog信号通路与肿瘤发生之间的关系被受到广泛的关注。Hedgehog信号通路，因其最上游配体Hedgehog(Hh)而得名，shh(sonic hedgehog)基因编码一种高度保守的分泌型糖蛋白，在胚胎和成人组织中最为常见、是一个重要的发育调控因子。patched(ptch)既是Hh信号的受体，又是Hh信号通路的目的基因，在调节Hh信号通路活性中起双重作用，在绝大多数Hh信号通路相关肿瘤中都有异常表达或突变。已经发现的与Hedgehog信号通路相关的肿瘤包括人类皮肤基底细胞癌、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、原发性神经外胚层肿瘤、横纹肌肉瘤、前列腺癌、乳腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、食道癌及胃癌等。 目前国内尚未见对shh、ptch在膀胱癌中表达的研究相关的文献报道。本研究的目的是通过研究shh和ptch在膀胱移形细胞癌中的表达情况，初步探讨shh和ptch在膀胱移行细胞癌中异常表达与肿瘤发生的关系，探索Hh信号通路在肿瘤发生中的作用机制，以期寻找对膀胱移行细胞癌早期诊断和治疗的分子靶点。 材料与方法 1、标本来源收集中山大学附属第二医院泌尿外科2005年6月至2006年12月间收治的膀胱移行细胞癌(BTCC)患者经手术切除的标本30例。其中男22例、女8例。年龄25～77岁，平均年龄58.80±12.95岁。初发病例27例，复发3例。另收集10例正常膀胱粘膜组织标本(取自于良性前列腺增生症手术患者)作为对照。年龄58～79岁，平均年龄67.40±6.15岁。膀胱癌组和正常膀胱粘膜组患者年龄无显著性差异(P<0.05)。膀胱肿瘤标本病理分级按WHO标准：G<,1>11例、G<,2>8例、G<,3>11例。临床分期按UICC-TNM标准：T<,is>-T<,1>20例，T<,2>-T<,4>10例。 2、实验方法 2.1逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)采用RT-PCR检测30例BTCC、10例正常膀胱粘膜中ptch mRNA的表达情况，并对PCR扩增结果采用半定量分析。 2.2免疫组织化学方法(S-P法)采用S-P法检测PTCH、SHH蛋白的表达情况，操作按照试剂说明书进行。用已知的有表达PTCH、SHH的大鼠视网膜组织切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。 3、统计学分析应用SPSS11.0统计软件进行分析，用t检验、x<2>检验及Fisher精确概率法进行检验，以α=0.05作为检验水准。 结果 1、RT-PCR30例BTCC组织中ptch mRNA表达的有29例(96.67﹪)，10例正常膀胱粘膜组织中均有表达(100.00﹪)，ptch mRNA在膀胱癌和正常膀胱粘膜中的表达率无显著性差异(P>0.05)。但通过对ptch mRNA表达的水平进行半定量分析表明BTCC组明显高于正常膀胱粘膜组，二者的差异有统计学意义(P<0.05)。 2、免疫组织化学2、1 PTCH蛋白在BTCC组织和正常膀胱粘膜的表达PTCH蛋白在BTCC组织中的阳性表达率为60.00﹪(18/30)，在正常膀胱粘膜组织中未见表达(0/10)，两者的差异有统计学意义(P<0.05)。表浅性BTCC(T<,is>-T<,1>)中PTCH蛋白的阳性表达率为75.00﹪(15/20)，浸润性BTCC(T<,2>-T<,4>)阳性表达率为30.00﹪(3/10)，二者的差异有统计学意义(P<0.05)。PTCH蛋白在G<,1>、G<,2>、G<,3>中的阳性表达率依次为90.90﹪(10/11)、62.50﹪(5/8)、27.27﹪(3/11)，G<,1>与G<,2>， G<,2>与G<,3>相比差异无统计学意义(P>0.05)，G<,1>与G<,3>差异有统计学意义(P<0.05)。 2、2 SHH蛋白在BTCC组织和正常膀胱粘膜的表达SHH蛋白在BTCC组织中的阳性表达率为53.33﹪(16/30)，在正常膀胱粘膜组织中未见表达(0/10)，两者的差异有统计学意义(P<0.05)。表浅性BTCC(T<,is>-T<,1>)中SHH蛋白的阳性表达率为70.00﹪(14/20)，浸润性BTCC(T<,2>-T<,4>)阳性表达率为20.00﹪(2/10)，二者的差异有统计学意义(P<0.05)。SHH蛋白在G<,1>、G<,2>、G<,3>中的阳性表达率依次为72.73﹪(8/11)、62.50﹪(5/8)、18.18﹪(2/11)，G<,1>与G<,2>，G<,2>与G<,3>相比差异无统计学意义(P>0.05)，G<,1>与G<,3>差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 1、BTCC和正常膀胱粘膜中都存在着Hedgehog信号通路，部分BTCC中有Hedgehog信号通路重要信号分子PTCH、SHH过度激活的表达； 2、PTCH、SHH在浅表性、高分化BTCC中的表达高于浸润性、低分化的BTCC，在正常膀胱粘膜中无PTCH、SHH蛋白表达； 3、Hedgehog信号通路的激活可能参与了BTCC的发生过程，提示Hedgehog信号通路有可能成为BTCC诊断和治疗的分子靶点。