论文部分内容阅读
苜蓿(Medicago sativa Linn.)作为优质牧草,在世界各国的畜牧业发展中占据着非常重要的地位。近年来,随着种植面积的增加,苜蓿病害日趋严重,已成为制约苜蓿产量与品质的主要因素。由苜蓿假盘菌(Pseudopeziza medicaginis)引起的苜蓿褐斑病是苜蓿生产中的主要病害之一,在各大苜蓿种植区均有不同程度的发生,研究苜蓿褐斑病对生产中选择适宜方法控制其为害具有重要意义。本文对宁夏六盘山地区紫花苜蓿褐斑病的发生和危害情况,褐斑病对苜蓿营养品质的影响,子囊孢子萌发特性和分泌细胞壁降解酶活性进行研究。研究结果如下:(1)田间调查结果表明:宁夏固原市、泾源县、隆德县苜蓿褐斑病发病情况严重,病情指数分别为68.61、30.01、75.81。(2)不同发病级别的苜蓿褐斑病叶片、茎秆中营养成分含量试验结果表明:随着感病程度的增加,苜蓿粗蛋白质(CP)、粗脂肪、K含量下降;中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗灰分、Ca、总酚、单宁含量增加;P含量未改变。其中,与健康叶片相比,Ⅳ级感病叶片中CP含量下降了15.64%,NDF、ADF增加了39.75%、71.10%,说明感病后的苜蓿营养成分严重受损。感病叶片中叶绿素a、叶绿素b分别下降了18.02%、70.25%,类胡萝卜素增加了42.31%,说明苜蓿假盘菌可破坏叶片的光合机构,扰乱正常的光捕获能力,是引致叶片衰老和脱落的因素之一。(3) P.medicaginis子囊孢子碳氮源利用试验结果表明:供试的5种碳源中,对碳源的利用率由强到弱依次为葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘油和乳糖,子囊孢子的萌发时间集中在4-9h。供试的9种氮源中,有机态氮源,酵母粉、牛肉膏、蛋白胨的子囊孢子萌发时间集中在5-13h,72h萌发率达到100%。无机氮源草酰乙酸和硫酸铵萌发率与对照琼脂基本一致;氨基乙酸和硝酸钠7-9h即可见有子囊孢子萌发,72h萌发率达到100%。(4) P.medicaginis子囊孢子萌发Ca2+/CaM信号系统试验结果表明:外源CaC12浓度在0.1-100mmol/L子囊孢子均可萌发,加入Ca2+螯合剂EGTA萌发受到抑制,同时加入EGTA(10mmol/L)和CaCl2(lmmol/L)仍然不能解除抑制作用,但是在EGTA(10mmol/L)中加入Ca2+载体A23187(10μmol/L),子囊孢子萌发率显著增大。PLC抑制剂Neomycin浓度在0.01-10mmol/L,子囊孢子不能萌发。Ca2+通道调节剂Nicardipine浓度为1mmol/L时,子囊孢子被溶解,其他浓度下均不萌发。CAM拮抗剂Chloropromazine浓度为0.01mmol/L,子囊孢子没有萌发且周围有絮状物环绕,浓度大于0.1mmol/L萌发亦受到抑制。(5) P.medicaginis分泌细胞壁降解酶及感病叶片细胞膜透性测定试验结果表明:子囊孢子以分泌果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)为主要细胞壁降解酶,随着培养时间延长PMG、羧甲基纤维素酶活性增强,β-葡糖苷酶活性较小且变化不明显。子囊孢子侵染苜蓿叶片对寄主的细胞膜透性破害严重,随着侵染时间的延长,膜透性增强,72h达到最大,为40.90%。