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体细胞克隆技术在家畜品种改良,药物生产、珍惜物种的保护特别在转基因克隆动物研究与应用方面具有非常重要的的研究价值。小白鼠作为目前研究最为深入,使用最为广泛的体细胞克隆模型,具有繁殖周期短这一其他物种不可比拟的优势,但是其克隆发育率低,仍旧是急需解决的问题。本实验从研究供核细胞的生长特性着手,试图研究抗氧化剂对小鼠胎儿成纤维细胞重构配发育的影响。目的：(1)检测昆明系小白鼠不同传代次数的胎儿成纤维细胞(MEF)的形态特征以及在特定应激条件下的细胞活力；(2)探究不同浓度维生素C (Vitamin C,VC)、维生素E (Vitamin E,VE)、褪黑素(Melatonin,MT)对供核细胞(胎儿成纤维细胞)的活力的影响(3)探究不同浓度维生素C (Vitamin C, VC)、维生素E(Vitamin E, VE)、褪黑素(Melatonin, MT)对经其处理后的供核细胞所构重构胚体外发育情况的影响进而得出各抗氧化剂最佳浓度。方法：(1)体外培养并建立小鼠胎儿成纤维细胞系,对指定代数细胞分别进行冷冻复苏后进行MTT活力测定、绘制生长曲线并与正常传代的细胞进行对比,选出最佳代数小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)作为供核细胞；(2)用不同浓度维生素C (0μM、100μM、150μM、200μM)、维生素E (OμM、25μM、50μM、100μM)、褪黑素(OM、10-8M、10-9M、10-10M)分别处理第1代正常培养与血清饥饿培养的小鼠胎儿成纤维细胞,通过MTT法测定各组活力,并进行比较；(3)用不同浓度抗氧化剂处理后的小鼠胎儿成纤维细胞作为供核细胞,再进行去核注核操作,构成重构胚,用SPSS11.0整理分析重构胚融合率、卵裂率和囊胚率。结果：(1)各代数小鼠胎儿成纤维细胞在形态学上并无明显差异；(2)实验中正常传代的1代、2代、3代、4代小鼠胎儿成纤维细胞活力差异均不显著(P>0.05)；玻璃化冷冻复苏后的1代和2代小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)差异不显著(P>0.05),但均高于3代、4代细胞(P<0.05)；该实验表明随着细胞代数的增加细胞对外界环境的抗性也在随之下降；故选定第1代细胞作为供核细胞；(3)小鼠胎儿成纤维细胞经过10%胎牛血清和不同浓度抗氧化剂培养液培养2天后,添加抗氧化剂的实验组细胞活力均高于对照组,但差异不显著(P>0.05)；而在经过0.5%胎牛血清饥饿处理后,添加抗氧化剂的实验组的细胞活力均显著高于对照组(P<0.05)。这表明血清饥饿诱导处理对供核细胞的正常生长发育带来了负面的影响；抗氧化剂的存在对这一负面的影响有改善和缓解的作用；(4)在添加维生素C实验中,重构胚体外发育融合率方面：三个实验组均显著高于对照组(P<0.05),150μM组融合率最高；在卵裂率方面：150μM组高于200μM和100μ M组,差异不显著(P>0.05),但三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)；在囊胚率方面：150μ M组高于200μ M和100μM组,差异不显著(P>0.05),但三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)。该实验表明血清饥饿处理过程中外源性添加维生素C的最佳浓度为150μM；(5)在添加维生素E实验中,融合率方面：三个实验组均显著高于对照组(P<0.05),实验组中100μM组融合率最高；在卵裂率方面：100μM组高于501μM和150μ M组,差异不显著(P>0.05),但三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)；在囊胚率方面：100μM组高于50μ M和150μ M组,差异不显著(P>0.05),但三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)。该实验表明血清饥饿处理过程中外源性添加维生素E的最佳浓度为100μM；(6)在添加褪黑素(MT)实验中,融合率方面：三个实验组均显著高于对照组(P<0.05),实验组中100μ M组融合率最高；在卵裂率方面：10-9M组高于10-8M,差异不显著(P>0.05),却显著高于10-10M组(P<0.05),10-8M高于10-10M组差异不显著(P>0.05),而三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)；在囊胚率方面：10-9M组高于另外两个实验组,差异不显著(P>0.05),但三个实验组均显著高于对照组(P<0.05)。该实验表明血清饥饿处理过程中外源性添加维生素E的最佳浓度为10-9M。