粤东地区儿童重症监护病房鼻病毒感染的流行情况及分子生物学研究

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目的:  探究2013年~2015年粤东地区儿童重症监护病房中鼻病毒感染的流行情况及分子生物学特征。  方法:  ⑴应用巢式RT-PCR技术,对咽拭子标本行鼻病毒5’UTR及VP4/VP2基因核苷酸序列扩增,并对阳性产物进行核苷酸序列测定。⑵对核苷酸序列测定明确为鼻病毒的咽拭子标本,采用多重PCR方法行呼吸道合胞病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、冠状病毒、甲型流感病毒H1N1、季节性H3N2病毒、人博卡病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体检测。⑶对鼻病毒检测阳性病例的临床资料进行统计分析。  结果:  ①743例咽拭子标本中鼻病毒阳性186例,总阳性率为25.03%,其中 A型鼻病毒97例(52.15%),B型鼻病毒16例(8.60%),C型鼻病毒42例(22.58%),未分型31例(16.67%)。②97例A型鼻病毒阳性标本中,合并其他病毒检出26例(26.80%),其中二重检出24例,三重1例(HRV、PIV、BOV),四重1例(HRV、RSV、PIV、InfB)。16例B型鼻病毒阳性标本中,合并其他病毒检出4例(25.00%),均为二重检出。42例C型鼻病毒阳性标本中,二重检出7例(24.67%),未见三、四重检出。③A型鼻病毒在2013年检出高峰为春夏季(16.36%、14.63%)、2014年为秋冬季(15.22%、12.66%)、2015年为春秋季(15.12%、16.95%);C型鼻病毒在2013年(6.38%、7.35%)、2014年(10.87%、7.59%)、2015年(8.47%、7.14%)检出高峰均为秋冬季。④97例A型鼻病毒阳性患儿年龄介于1个月~11岁(中位年龄为8个月),在<6月患儿组及6月~12月患儿组中检出率最高,分别为13.84%、15.04%;16例B型鼻病毒阳性患儿年龄在1月~8岁(中位年龄为8个月),在12月~24月患儿组中检出率最高,为4.34%;其次是<6月患儿组,为2.77%;42例C型鼻病毒阳性患儿年龄在1月~9岁(中位年龄为9月),在6月~12月患儿组中检出率最高,为6.77%;其次为<6月患儿组,为6.57%。⑤在VP4/VP2基因亲缘性关系分析中,鼻病毒毒株分为独立三个分支,分为A、B、C三型,其中29株属于A型鼻病毒,4株属于B型鼻病毒,21株属于C型鼻病毒,可见多个血清型共同流行,未见优势血清型。A型鼻病毒组内核苷酸序列同源性为69.5%~99.8%,B型鼻病毒组内核苷酸序列同源性为74.3%~81.2%,C型鼻病毒组内核苷酸序列同源性为70.6%~99.8%,不同基因型鼻病毒组间核苷酸序列同源性为54.9%~67.0%。  结论:  ⑴鼻病毒检测率高,可能是重症感染的病原体之一。⑵C型鼻病毒季节流行性可能较A型鼻病毒明显。⑶鼻病毒在粤东地区存在多个基因型和血清型共同流行,A型鼻病毒为优势流行基因型。⑷不同基因型鼻病毒间具有较高的遗传性变异性。
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