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研究背景及目的：房颤（心房纤颤）在临床上极为普遍，但由于目前对房颤的发生发展的机制仍未研究透彻，以致至今对房颤的治疗效果不完全理想，且远期复发率仍较高。目前对房颤发生机制的认识主要为电重构，结构重构等过程。microRNAs作为表观遗传学的一个组成部分，参与了各种生理、病理生理过程的发生发展，得到人们越来越多的重视。近年研究发现miR-34a在心脏衰老和纤维化中起到重要的作用，而其中的一个预测靶蛋白锚蛋白-B（Ankyrin-B，Ank-B）在获得性、遗传性心脏病中的作用也得到了人们关注。目前发现Ankyrin-B的表达变化在房颤中发挥着重要作用，但两者之间是否存在相互作用关系，miR-34a是否对Ank-B进行调控，从而参与了心房重构的发生，并在房颤的发生发展中发挥一定的作用。本实验即利用房颤患者和培养细胞模型进行研究，探讨microRNAs参与房颤发生发展的新机制，为房颤新的治疗方法的提出奠定理论基础。研究方法：1.选取临床上行瓣膜置换术的风湿性瓣膜病的房颤心律（房颤组）和窦性心律（窦性组）患者的心房组织，利用real time qPCR检测microRNA的表达，免疫组化和免疫印迹（Western Blotting）检测Ank-B的表达。2.原代培养SD乳鼠心房肌细胞，并利用盐酸异丙肾上腺素刺激培养的心肌细胞来模拟房颤早期细胞电生理改变，real time qPCR检测miR-34a的表达变化，并根据miR-34a的表达情况选择盐酸异丙肾上腺素的最佳处理时间。3.利用miR-34a的特异性干扰试剂，Agomir、Antagomir以及分别的阴性对照试剂Ago-N、Ant-N，对miR-34a的表达进行干预，检测Ank-B、Na+/Ca2+交换体1（NCX1）的蛋白表达变化。4.加入盐酸异丙肾上腺素后进一步检验步骤3中各项指标的变化。5.利用激光共聚焦显微镜检测miR-34a的特异性干扰试剂以及盐酸异丙肾上腺素作用下，细胞内Ca2+信号的变化。6.利用双荧光素酶报告基因验证miR-34a与Ank-B的mRNA3`端非翻译区（Untranslated Regions，UTR）靶向结合。研究结果：1. miR-34a在房颤组心房组织中的表达较窦性组增高，而Ank-B的表达较窦性组降低。2.利用原代培养的SD乳鼠心房肌细胞，给予盐酸异丙肾上腺素刺激，并根据miR-34a的表达情况选择出最佳盐酸异丙肾上腺素作用时间为12h。3.成功对miR-34a进行特异性干扰，与空白组相比，Agomir组Ank-B及NCX1蛋白表达降低，Antagomir组Ank-B及NCX1蛋白表达增高，各自阴性对照组Ank-B与NCX1的表达与空白组无明显差异。4.进一步加入盐酸异丙肾上腺素处理后，发现处理后较处理前，除了Antagomir组以外，其余各组Ank-B的表达较处理前进一步降低，NCX1表达仅在Agomir组较前进一步降低，余较处理前变化不明显。5.激光共聚焦检测发现，与空白组相比，盐酸异丙肾上腺素+Agomir组细胞内Ca2+信号较其他组更强，单独盐酸异丙肾上腺组次之，单独Agomir组随后，Ca2+信号强度依次减弱。6.双荧光素酶报告基因显示，转染野生型（WT）ANK2载体的细胞中，与空白组相比，Agomir组荧光比值降低，Antagomir组荧光比值略增高，各自阴性对照组荧光比值与空白组无明显差异；转染突变型（MUT）ANK2载体的细胞中，各组荧光比值均无明显差异。结论：1. miR-34a在房颤患者心房组织中的表达较窦性组增高，而Ank-B表达较窦性组降低。2. miR-34a可直接调控Ank-B的表达，可能在房颤早期的心房肌细胞电生理改变的过程中发挥作用。