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蛋白质组学的研究是21世纪生命科学的焦点之一。探索新的分离分析方法和技术解决高丰度蛋白的去除和低丰度蛋白的富集是分离科学研究的重大课题。分子印迹技术和毛细管电色谱技术是近年来迅猛发展的高选择性的分离技术和高效的微分离技术。本文的研究目标是将这两种技术结合起来,探求蛋白质分离识别的新方法。立足于这两项技术,论文的研究内容包括:
1、以生物大分子.四肽(YPLG,MW=448.61)为模板分子成功地制备了毛细管印迹整体柱。以印迹整体柱的通透性和色谱行为为依据,结合扫描电镜图观察柱形貌,系统地研究了致孔剂、功能单体和交联剂的选择和比例,优化了制备条件。在电色谱模式下对印迹整体柱的性能(电渗流,柱效)进行了评价,考察了各种电色谱条件对模板分子及其结构类似物识别的影响。
2、采用抗原决定基法,首次合成了以催产素的抗原决定基(YPLG)为模板分子的毛细管印迹整体柱,催产素的印迹因子可达4.013。考察了各种电色谱条件(流动相中乙腈含量、缓冲溶液的pH和盐浓度)对催产素保留的影响。催产素和牛血清白蛋白、牛血红蛋白、溶菌酶以及卵清蛋白的分离表明,印迹整体柱对催产素具有专一的识别能力。
3、从有机聚合物基质和硅胶基质两方面,初步探索了利用抗原决定基法以九肽为模板分子的分子印迹整体柱的制备。研究了各种条件对反应速度和柱体通透性的影响。
4、以矩形前沿分析法研究了分子印迹整体柱的热力学行为。以原位聚合法制备了对.羟基苯甲酸印迹整体柱,通过测定热力学吸附等温线系统地考察了流动相中乙酸的含量、有机溶剂的性质和柱温对印迹整体柱吸附和选择能力的影响。