目的:构建新基因Neurobeachin Like 1(NBEAL1)的表达载体,表达纯化重组蛋白并鉴定其生物活性,制备单克隆抗体并检测NBEAL1蛋白在不同恶性程度脑胶质瘤中的表达情况。方法:通过先提取正常人脑组织的总RNA,反转录得到cDNA,筛选合适的片段构建pGEX-KG/NBEAL1表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,GST蛋白亲和纯化,Western Blotting鉴定纯化产物的纯度和特异性,制备单克隆抗体,并用所制备的抗体研究该蛋白在肿瘤恶性程度变化中的作用。结果: NBEAL1基因片段被克隆入pGEX-KG表达载体,测序证实克隆片段序列正确,NBEAL1融合蛋白在包涵体中表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上。Western Blotting证明所纯化的蛋白含有GST标签与NBEAL1肽段。2株单克隆抗体被成功制备。该蛋白在正常脑组织中表达较低,而在低级别的脑胶质瘤组织中表达明显上调,并且恶性程度越高,NBEAL1的表达程度越低,两者呈负相关。结论:NBEAL1基因片段被成功克隆、表达及纯化;它的单克隆抗体被成功制备;它在脑胶质瘤中的表达量与胶质瘤的恶性程度具有相关性。本研究为进一步阐明NBEAL1基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用奠定了基础。