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目的:研究长链非编码RNA人浆细胞瘤转化迁移基因1(LncRNA PVT1)在晚期糖基化终产物(Advanced glycation end products,AGEs)引起的软骨细胞自噬活性变化及软骨基质退变中的影响。方法:(1)AGEs(100mg/L)分别处理人软骨细胞12h、24h、48h后,用荧光定量PCR检测COL2A1、MMP13、LncRNA-PVT1的表达量。(2)AGEs(100mg/L)分别处理人软骨细胞12h、24h、48h后,Western Blot方法检测细胞Beclin1、LC3Ⅱ蛋白的表达,AGEs处理前,将软骨细胞转染自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3),产生融合标记蛋白以观察其处理后的自噬小体数目变化情况。(3)软骨细胞分别转染si-NC和三种si-PVT1,用荧光定量PCR方法检测其干扰效率。(4)CCK-8法测定分别转染si-NC和si-PVT1后经AGEs(100mg/L)处理的软骨细胞在0h、12h、24h、48h的增殖活性。(5)AGEs(100mg/L)处理si-PVT1干扰后的人软骨细胞48h后,荧光定量PCR方法检测细胞COL2A1,MMP13的表达,Western Blot方法检测细胞Beclin1、LC3Ⅱ蛋白的表达,电子透射显微镜(TEM)进行细胞内自噬小体计数,AGEs处理前,将软骨细胞转染自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)后产生融合标记蛋白以观察其自噬小体数目变化情况。结果:(1)AGEs(100mg/L)处理后的细胞MMP13的基因表达量在48h内逐渐增加,COL2A1的基因表达量逐渐降低。自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达在24h达到最大,在48h时LC3Ⅱ、Beclin1蛋白下降。12h与24h的LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达量分别与对照组比较的差异有统计学意义;24h与48h的LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达量的差异有统计学意义。在细胞处理12h、24h后,自噬小体数目明显高于对照组。而在48h时,细胞内的自噬小体数目较24h时明显降低。AGEs处理软骨细胞48h内LncRNA-PVT1表达量逐渐升高。(2)三种si-PVT1的干扰效率都是明显的,与si-NC组相比具有统计学差异,但以si-PVT1-2的干扰效率最为显著。(3)si-PVT1组较siNC组在12h、24h、48h时的细胞活性高,且差异有统计学意义。(4)AGEs(100mg/L)处理软骨细胞48h后,MMP13的mRNA表达量在si-PVT1转染过的细胞中表达较siNC组降低。而COL2A1的mRNA在si-PVT1的细胞中表达较siNC组升高。LC3Ⅱ、Beclin1蛋白的表达在si-PVT1组中表达与siNC组比较有增加,其差异有统计学意义。高倍镜下观察,si-PVT1组自噬小体数量比siNC组高,差异有统计学意义。TEM下观察,si-PVT1 2组自噬小体数量比siNC组高。结论:AGEs诱导软骨细胞早期自噬活性增加,后期自噬活性降低。AGEs诱导LncRNA-PVT1的表达增加抑制软骨细胞后期自噬,促进软骨基质退化,降低细胞增殖活性。