研究背景及目的：宫颈癌是世界范围内女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌。据统计，我国每年的新增发病人数就高达约13万，且患病女性年龄呈年轻化的趋势。现已明确，高危型人乳头瘤病毒持续感染是宫颈癌发生的主要病因。在治疗方面，根治性子宫切除术及辅助性放化疗的不断完善，使早期宫颈癌患者的5年生存率提高到90%左右，但是对于晚期宫颈癌患者的治疗效果仍不容乐观。放射治疗是局部晚期宫颈癌最主要的治疗方式之一，但肿瘤辐射抵抗效应的产生，进而诱发肿瘤复发、转移等，严重影响了放疗效果。微小RNA（microRNAs，miRNAs）是一类长度约为20-22个核苷酸的短小非编码RNA。近年来，研究发现，miRNAs的异常表达在肿瘤发生、发展中起着重要的作用，影响着肿瘤细胞的增殖、凋亡、分化、转移等。此外miRNAs还与肿瘤的治疗反应密切相关，且越来越多的研究证实多个miRNAs可以调节肿瘤细胞的放疗敏感性。筛选能预测放疗敏感性的miRNAs，并研究其在放疗敏感性调节中的作用及机制，能更好地解释辐射抵抗效应产生的原因，进而有助于为癌症患者制定更加高效、低害的个体化的治疗方案，并为放疗增敏治疗提供一个新的思路，有着重要的临床意义。以往研究证实，Hsa-miR-145-5p（miR-145）是重要的抑癌相关miRNA，在多种肿瘤中降调表达，同时也是放疗相关miRNAs中颇具研究价值的一个分子。miR-145的表达受p53的调控，而后者作为基因卫士，在细胞应激刺激时起着促进细胞周期阻滞、凋亡的抑癌作用。多个基于宫颈癌的芯片研究发现miR-145在宫颈癌组织中显著下调表达，而上调后可有效抑制癌细胞增殖、增加药物敏感性。且有研究发现，辐射致癌小鼠模型的胸腺肿瘤组织、辐射刺激后的前列腺癌细胞中，miR-145的表达都出现了明显的变化。然而，miR-145与宫颈癌临床病理因素的相关性，及是否能够参与宫颈癌的放疗敏感性调节，尚无相关研究报道。在本课题中，我们结合临床样本，进一步验证、分析miR-145的降调有何临床意义，并在细胞、动物层面过表达miR-145，研究其对宫颈癌细胞放疗敏感性的调节作用及机制。材料与方法：我们首先收集42例临床宫颈癌患者的宫颈癌组织及癌旁非肿瘤组织中，利用RNA抽提、反转录及实时定量PCR技术，检测组织中miR-145表达水平的变化。并分析miR-145表达水平与宫颈癌临床病理因素的相关性。随后，我们挑选了对放疗较为敏感的人宫颈表皮癌细胞Me180细胞株及倾向于放疗抵抗的人宫颈腺癌来源的HeLa细胞和人宫颈鳞癌来源的SiHa细胞，检测不同放疗敏感性的宫颈癌细胞株中miR-145的表达差异，以及辐射处理后的变化情况。我们又利用miRNA模拟物mimic在宫颈癌细胞中过表达miR-145，用Cell Counting Kit-8（CCK-8）试剂、酶标仪检测宫颈癌细胞辐射后细胞活性的变化情况。采用Annexin V-FITC联合碘化丙啶染色液（Propidium Iodide，PI）双标记流式细胞术检测宫颈癌细胞辐射处理后的凋亡情况。我们还构建了HeLa细胞株裸鼠移植瘤模型，行辐射治疗，并予瘤内注射miRNA长效激动剂agomir，在瘤内外源性过表达miR-145，在体外水平研究miR-145对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响。最后，我们利用生物信息学分析及芯片技术，筛选出miR-145与宫颈癌及放疗相关的靶基因，在组织样本中验证其与miR-145的相关性，并在过表达miR-145的细胞中行RT-qPCR和Western blot，检测其mRNA、蛋白水平变化，还对裸鼠移植瘤中行免疫组织化学检测，分析其表达水平的变化。研究结果miR-145在宫颈癌组织中显著低表达，且其降调水平与临床晚期、较大的肿瘤体积、中低分化程度密切相关。miR-145在放疗敏感细胞Me180中表达水平高于放疗抵抗细胞HeLa、SiHa，且放疗抵抗细胞在放疗后，miR-145的水平也相应上调。过表达miR-145，可增加放疗后宫颈癌细胞的凋亡水平，降低细胞存活率。瘤内注射miR-145agomir，抑制肿瘤的生长速度，增强放疗敏感性。经生物信息学及芯片分析，我们挑选出与宫颈癌及放疗敏感性相关的靶基因HLTF。在细胞和组织水平，实验结果示miR-145可抑制HLTF的表达。研究结论①miR-145在宫颈癌中下调表达，且与临床晚期、较大的肿瘤体积、中低分化程度密切相关。②miR-145可通过促进细胞凋亡、降低细胞存活率来正向调节宫颈癌的放疗敏感性。③miR-145可抑制HLTF的表达，miR-145可能通过降调HLTF来发挥降低宫颈癌细胞放疗抵抗性的作用。