转拟南芥系统获得抗性调节基因(NPR1)烟草的获得及其遗传分析

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为了了解异源系统获得抗性调节基因在烟草中的表达是否能使烟草对广泛的病原菌具有较高的抗病性,以烟草叶盘作为转化受体,将拟南芥NPR1基因成功地导入了烟草K326和遵烟1号,转化率分别为27.3﹪、29.8﹪.烟草K326和遵烟1号各获得44株和9株经PCR和PCR-Southern杂交鉴定为阳性的转基因植株.通过自交获得了16株转基因K326的T<,0>代种子,对这些种子进行了卡那霉素(Km)抗生筛选并统计T<,1>代幼苗的Km抗性分离比,结果有9个株系的T<,1>代细苗对Km抗性按3:1分离.以NPR1基因引物对T<,1>代株系进行PCR鉴定,每个株系鉴定3株,除6株外其余都能扩增出目的片段.随机选取5个株系的PCR产物进行测序,结果表明所有PCR产物的序列均与拟南芥NPR1基因的对应序列完全一致.
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